2018年8月，我們曾報道華人科學(xué)家發(fā)現(xiàn)腫瘤能通過外泌體釋放PD-L1，猖狂地壓制全身免疫系統(tǒng)，造成患者免疫力低下。

不過，它們猖狂到頭了，科學(xué)家已經(jīng)找到對付腫瘤外泌體的辦法。

最近，加州大學(xué)舊金山分校的RobertBlelloch教授團隊發(fā)現(xiàn)，腫瘤分泌的外泌體可能進入腫瘤引流淋巴結(jié)和脾臟中，抑制免疫細胞。他們還發(fā)現(xiàn)，抑制腫瘤外泌體的形成和釋放，能消除多種腫瘤對PD-L1抑制劑的耐藥性，并讓免疫系統(tǒng)形成對該腫瘤的長期免疫記憶，使其充當了腫瘤疫苗。

此外，該研究還指出，在某些癌癥中，將腫瘤組織中的PD-L1表達水平作為預(yù)測免疫治療效果的標志物，是不準確的，而血液中的PD-L1水平也應(yīng)當是一個需要考慮的因素。相關(guān)研究發(fā)表在頂級期刊《細胞》上，論文的第一作者是MauroPoggio博士和TianyiHu博士[1]。

從論文來看，Robert團隊應(yīng)當是在2018年那篇《自然》論文發(fā)表之前，就獨立發(fā)現(xiàn)了腫瘤通過外泌體釋放PD-L1壓制全身免疫系統(tǒng)的現(xiàn)象，所以這篇文章將從發(fā)現(xiàn)之初開始講起。

PD-(L)1抑制劑開啟了癌癥免疫治療的新時代，但是其局限也同樣為大家所熟知，那就是只有一小部分人（10%-30%）能從該療法中獲益[2]。為了解決這個問題，在進行免疫治療前，人們通常會先對患者腫瘤組織的PD-L1表達水平進行檢測，以便找出可能對免疫治療獲益的患者。

從原理上看，這個辦法是行得通的，癌細胞利用PD-L1蛋白抑制免疫系統(tǒng)，那么PD-L1表達水平更高的腫瘤也應(yīng)該更能響應(yīng)免疫治療，這在很多臨床研究中也得到了證實。

不過，Robert團隊在研究前列腺癌時，卻發(fā)現(xiàn)了令人捉摸不透的現(xiàn)象。研究人員對癌細胞PD-L1的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平進行檢測發(fā)現(xiàn)，前列腺癌細胞PD-L1的mRNA水平足足是黑色素瘤細胞的15倍，經(jīng)過一系列對mRNA翻譯率的檢測，研究者認為，相比黑色素瘤細胞，前列腺癌細胞應(yīng)當是生產(chǎn)了更多的PD-L1蛋白的。

可奇怪的是，這兩種癌細胞表面的PD-L1蛋白水平卻是相當?shù)摹８婀值氖?，黑色素瘤能很好地響?yīng)PD-L1抑制劑，而前列腺癌卻不行[3]。

Robert團隊開始尋找前列腺癌細胞生產(chǎn)的巨量PD-L1蛋白的去處。既然蛋白已經(jīng)產(chǎn)生了，那它肯定不可能憑空消失。他們先是檢測了細胞內(nèi)的蛋白降解系統(tǒng)，并沒有發(fā)現(xiàn)PD-L1被降解的線索。

那這些PD-L1蛋白到底去哪兒了呢？既不在細胞內(nèi)，又沒有被降解，那只能是被分泌到細胞外了。

于是，研究人員檢測了前列腺癌細胞的胞外囊泡，終于找到了消失的PD-L1蛋白的蹤跡。并且發(fā)現(xiàn)，這些PD-L1蛋白都是通過外泌體被釋放的（外泌體是胞外囊泡的一種）。

腫瘤細胞通過外泌體釋放PD-L1，自然不是為了干好事。

研究人員發(fā)現(xiàn)，這些外泌體中的PD-L1蛋白，在體外能夠抑制T細胞的活化。他們在小鼠中也發(fā)現(xiàn)，這些外泌體在腫瘤引流淋巴結(jié)，這個免疫細胞阻擊腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的前沿陣地，抑制T細胞的活化和增殖，推動腫瘤的進展。此外，脾臟中的免疫細胞也受到了影響。

發(fā)現(xiàn)了問題，就可能找到解決問題的辦法。既然含PD-L1的外泌體對腫瘤的進展至關(guān)重要，那么外泌體也可能是其弱點。

外泌體的產(chǎn)生需要很多蛋白的幫助，包括一個叫NSMASE2的酶，負責的外泌體生成，和一個叫RAB27A的酶，參與外泌體的分泌過程[4,5]。

研究人員通過CRISPR技術(shù)，將前列腺癌細胞的NSMASE2、RAB27A或者PD-L1基因分別敲除，檢測發(fā)現(xiàn)，這些癌細胞的增殖能力都沒有受到影響，只是PD-L1或者外泌體被消除了。

將這些癌細胞注射到模型小鼠中，以正常的前列腺癌細胞作為對照。檢測發(fā)現(xiàn)，對照組小鼠出現(xiàn)了明顯的腫瘤生長。而PD-L1缺失或者不能分泌外泌體的癌細胞，并不能在小鼠中形成腫瘤，并且長期生存率遠強于對照組。

以上實驗說明，外泌體對前列腺癌的發(fā)展是至關(guān)重要的，而之前發(fā)現(xiàn)的前列腺癌對PD-L1抑制劑的抗性，可能可以通過抑制外泌體來解決。

不僅如此，當對這些曾經(jīng)接種過缺陷癌細胞的小鼠，再注射正常癌細胞時，發(fā)現(xiàn)其也不能在小鼠體內(nèi)形成腫瘤了，小鼠形成了全身性的免疫記憶，這些失去外泌體的癌細胞充當了腫瘤疫苗！

而這個發(fā)現(xiàn)的意義不止局限于前列腺癌，之前的研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌只能對PD-L1抑制劑有部分響應(yīng)，研究人員推測外泌體在其中發(fā)揮了抗藥作用。

于是，他們將癌細胞的外泌體分泌能力消除后，再用PD-L1抑制劑進行治療，發(fā)現(xiàn)明顯提升了用PD-L1抑制劑治療的效果，部分解除了腫瘤的耐藥性。當然，在結(jié)直腸癌中，敲除外泌體的作用不如前列腺癌好。

這項研究在多種腫瘤中證明，腫瘤會釋放外泌體壓制全身的免疫系統(tǒng)，促進腫瘤的進展，印證了之前的研究，并將指導(dǎo)人們繼續(xù)探索其他類型的腫瘤，是否也能通過外泌體的釋放來壓制免疫系統(tǒng)。

并且，他們還找到了克制腫瘤分泌外泌體能力的靶點，證實抑制該靶點可以抑制外泌體的形成，克服PD-L1抑制劑的耐藥性，并且還有助于機體形成腫瘤免疫記憶，這為提升免疫治療效果開辟了新的道路。

此外，這個研究還指出，目前通過檢測腫瘤組織PD-L1蛋白水平的方法，并不能作為準確的免疫治療標志物，還需要考慮血液外泌體中PD-L1的水平，至少在前列腺癌中是這樣。