微生物感染性角膜炎在世界范圍內(nèi)仍是致盲的重要原因，尤其是真菌感染、棘阿米巴感染所致的巨大角膜潰瘍，由于組織破壞嚴(yán)重，更是為及時(shí)的診治帶來巨大挑戰(zhàn)。雖然借助微生物學(xué)檢查可以提高診斷的準(zhǔn)確性，但畢竟不論微生物涂片還是培養(yǎng)都需要一定時(shí)間，且由于此類患者角膜潰瘍累及層次較深，臨床上有時(shí)也很難取到足夠的角膜組織。活體共聚焦顯微鏡（IVCM）的出現(xiàn)為角膜組織的觀察和病原診斷提供了便利，可以直接觀察患者角膜病變情況，發(fā)現(xiàn)致病微生物，從而第一時(shí)間給予診斷和治療（圖1）。那么它與傳統(tǒng)的病原診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”相比成績?nèi)绾文兀?/p>

IVCM下典型角膜潰瘍圖像：A角膜潰瘍中心大量重疊的鐮刀菌屬菌絲B角膜潰瘍邊緣相對(duì)分散的真菌菌絲C棘阿米巴原蟲包囊呈鏈狀或團(tuán)塊狀分布

近期一項(xiàng)前瞻性雙盲對(duì)照研究探討了IVCM在真菌性和棘阿米巴角膜潰瘍診斷中的價(jià)值。研究共納入239例感染性角膜炎患者，行全面眼科檢查，再先后行IVCM檢查及角膜刮片微生物涂片及培養(yǎng)。微生物涂片及培養(yǎng)檢查者及4位IVCM閱片者均不知患者相關(guān)臨床資料，但有1位IVCM閱片者知曉患者全部病歷情況。最后比較IVCM與病原學(xué)診斷的敏感性和特異性。微生物涂片及培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)真菌感染176例（74%），棘阿米巴感染17例（7%），細(xì)菌感染19例（8%），IVCM在診斷真菌性角膜炎的敏感度和特異度分別為85.7%和81.4%，其中可以獲知患者臨床情況的IVCM閱片者診斷敏感度可以高達(dá)89.8%；病程較短的患者（＜4d）中，IVCM診斷敏感度可以達(dá)到95%，隨著病程延長（＞10d），IVCM敏感度則降至72%。IVCM在發(fā)現(xiàn)阿米巴原蟲方面，敏感性和特異性分別為88.2%和98.2%。對(duì)于IVCM假陽性和假陰性的病例，研究者也著重進(jìn)行了分析，例如11例涂片、培養(yǎng)均陰性的患者，IVCM檢查中卻發(fā)現(xiàn)了典型的真菌菌絲或阿米巴原蟲（圖2），結(jié)合其臨床表現(xiàn)，研究者認(rèn)為11例患者確存在相關(guān)病原的感染，可能由于角膜潰瘍已深達(dá)后1/3角膜組織，刮片取得組織較少而導(dǎo)致了微生物涂片及培養(yǎng)檢查均為陰性。而9例IVCM“假陰性”的患者普遍存在角膜組織水腫嚴(yán)重不透明或IVCM配合欠佳取得圖片較少的情況。因此研究者認(rèn)為如能很好的進(jìn)行IVCM檢查，并結(jié)合相關(guān)臨床資料，其對(duì)角膜潰瘍病原診斷還是有極大幫助的。

微生物涂片、培養(yǎng)均為陰性但I(xiàn)VCM有陽性發(fā)現(xiàn)的6例，A-E為真菌感染，F(xiàn)為棘阿米巴原蟲感染

總之IVCM具有無創(chuàng)、快捷的優(yōu)勢，結(jié)合臨床具體情況，可以為真菌性、阿米巴感染角膜潰瘍的及時(shí)診斷和治療提供較大幫助。

活體共聚焦顯微鏡（IVCM）的工作原理是聚光鏡和物鏡焦點(diǎn)相同，可用于眼表各層組織的實(shí)時(shí)、無創(chuàng)檢測和動(dòng)態(tài)觀察。適用于多種角膜疾病的診斷和隨訪，包括感染性角膜疾病的診斷、各種角膜變性和營養(yǎng)不良的形態(tài)學(xué)檢測等。自應(yīng)用于臨床以來，被認(rèn)為是眼表疾病研究最有價(jià)值的工具之一，尤其在真菌、阿米巴感染性角膜潰瘍的診斷和隨訪過程中，由于其圖像的特異性，不僅具有較高的診斷敏感性和特異性，而且無需角膜刮片和組織活檢，其可重復(fù)性檢測的特點(diǎn)在中重度角膜潰瘍患者和治療隨訪的診治中也顯示出其顯著的優(yōu)勢。在經(jīng)過治療，角膜刮片或者裂隙燈檢查陰性的患者，IVCM仍可顯示病原體的存在，為臨床診治提供更多信息。