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蛋白酪氨酸磷酸酶對(duì)RPE細(xì)胞的影響

2019-05-09 來(lái)源:協(xié)和眼科咨詢  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護(hù)膚
摘要:增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR),是眼科臨床比較常見(jiàn)的體征,目前PVR纖維增殖膜的細(xì)胞成分已經(jīng)明確,而且公認(rèn)RPE細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程(EMT)對(duì)PVR的發(fā)生起著作用,EMT可以使細(xì)胞外基質(zhì)在纖維增殖膜中過(guò)度沉積,但是EMT發(fā)生的機(jī)制尚不清楚。

增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR),是眼科臨床比較常見(jiàn)的體征,目前PVR纖維增殖膜的細(xì)胞成分已經(jīng)明確,而且公認(rèn)RPE細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程(EMT)對(duì)PVR的發(fā)生起著作用,EMT可以使細(xì)胞外基質(zhì)在纖維增殖膜中過(guò)度沉積,但是EMT發(fā)生的機(jī)制尚不清楚。

蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)作為生物體內(nèi)一種重要的功能酶,對(duì)細(xì)胞的增殖活動(dòng)起重要的調(diào)節(jié)作用,并且在維持細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)連接中起作用。以往研究證實(shí)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)抑制劑正釩酸鈉(SOV)可以加速RPE細(xì)胞周期,影響RPE細(xì)胞正常分化。PTPs抑制劑可能是使RPE細(xì)胞發(fā)生EMT的原因。蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)是一種非受體型PTPs,主要位于胞漿內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,TCS-401是一種選擇性PTP1B抑制劑。

方法:建立視網(wǎng)膜脫離動(dòng)物模型(SD大鼠右眼用30G針頭經(jīng)鞏膜注射透明質(zhì)酸鈉到視網(wǎng)膜下,左眼為正常對(duì)照組),取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物RPE細(xì)胞培養(yǎng),分離神經(jīng)上皮、RPE和Bruch膜。通過(guò)免疫熒光染色、蛋白提取和免疫印記(WesternBlot)等方法對(duì)相關(guān)蛋白、細(xì)胞成分和RPE細(xì)胞遷移率進(jìn)行測(cè)定。

結(jié)果與結(jié)論:PTP1B在視網(wǎng)膜脫離區(qū)域表達(dá)減少(圖1,熒光減弱);加入了TCS-401之后,RPE細(xì)胞的增殖增多,細(xì)胞因子A和細(xì)胞因子D(cyclinA和D1)表達(dá)升高;PTP1B抑制劑TCS-401增加了RPE細(xì)胞向成纖維細(xì)胞的分化,同時(shí)也增加了RPE細(xì)胞的遷移。而TCS-401活化了Erk和Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路,說(shuō)明Erk和Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路可能在PVR形成過(guò)程中起作用。

本文第一次研究了PTP1B在RPE中的表達(dá),以及PTP1B抑制劑在調(diào)節(jié)RPE細(xì)胞增殖、分化和遷移過(guò)程中的作用。對(duì)Erk和Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路在PVR形成過(guò)程中的作用做出了預(yù)測(cè),為PVR發(fā)生機(jī)制的研究拓展了方向。

基礎(chǔ)研究需要敏感的科學(xué)眼光和一絲不茍的科研精神。細(xì)胞的增殖、遷移、轉(zhuǎn)化、凋亡是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程。各個(gè)因子在這個(gè)網(wǎng)絡(luò)中的作用也同樣復(fù)雜難辨。本研究聚焦于增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變這一治療難點(diǎn),通過(guò)嚴(yán)密的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)首次證實(shí)了PTP1B在視網(wǎng)膜脫離區(qū)域的RPE細(xì)胞中減少,而其抑制劑可以明顯增加RPE細(xì)胞的增殖和RPE細(xì)胞的遷移。本研究為復(fù)雜的PVR形成機(jī)制貢獻(xiàn)了新的研究方向,希望更多的團(tuán)隊(duì)共同努力,早日攻克這一眼科領(lǐng)域的難點(diǎn)。

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