我們地球人都知道，蛋白質(zhì)是生命的基礎(chǔ)。對(duì)體弱有病的人，醫(yī)生常常囑咐要多補(bǔ)充蛋白質(zhì)。那么，人體內(nèi)的蛋白質(zhì)，就是多多益善的嗎？
非也！今兒我們就來說道說道。
想必大家都聽過MM吧。妹妹？美眉？
What？你想什么呢！我說的醫(yī)學(xué)里的MM——多發(fā)性
骨髓瘤（multiplemyeloma）啊。這個(gè)MM最為顯著的一個(gè)特征是，生化檢驗(yàn)結(jié)果中，總蛋白和
球蛋白會(huì)異常增高。
MM的患者會(huì)出現(xiàn)骨痛、腎功能不全、反復(fù)感染、貧血和出血等一系列問題。[1]因此，人體內(nèi)的蛋白質(zhì)，并非是越多越好啊。
MM與華氏巨球蛋白血癥等都屬于漿細(xì)胞病。它們的共同特征是，骨髓內(nèi)漿細(xì)胞異常增生，導(dǎo)致單克隆免疫球蛋白[或者被稱為副蛋白（paraprotein）]過度生成。
除漿細(xì)胞病外，在慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤、結(jié)腸癌、肝硬化、自身免疫性疾病，以及寄生蟲病等中，都可能產(chǎn)生單克隆免疫球蛋白。[1]
過量的單克隆免疫球蛋白，不僅會(huì)對(duì)患者的腎臟等造成損害。他們的存在，還會(huì)對(duì)很多檢驗(yàn)項(xiàng)目造成干擾，得出假性的結(jié)果。
如果不加以識(shí)別和糾正，這些假性的結(jié)果會(huì)干擾對(duì)患者的診治。因此，這類MM可一點(diǎn)都不美啊。
下面我們就來見識(shí)一下，這些單克隆免疫球蛋白，在日常檢驗(yàn)工作中，到底有多可惡。
生化檢驗(yàn)
現(xiàn)在絕大多數(shù)生化項(xiàng)目的檢測(cè)，都是利用特定試劑與血清，在水溶液中進(jìn)行反應(yīng)。通過監(jiān)測(cè)反應(yīng)前后吸光度的變化，來計(jì)算待測(cè)物質(zhì)的濃度。
而MM等患者血清中的單克隆免疫球蛋白，就可能會(huì)在這些反應(yīng)溶液中沉淀出來。使反應(yīng)的吸光度發(fā)生異常改變，從而得出假性結(jié)果。
那么如何識(shí)別這類假性結(jié)果呢？有的人會(huì)說，結(jié)合臨床呀。符合臨床的結(jié)果，就是真的。不符合臨床的，就是有干擾的。
但這往往是不現(xiàn)實(shí)和不具有可操作性的。比如，在MM的患者中，常會(huì)出現(xiàn)假性高磷血癥。[2]這該如何鑒別呢？
高磷血癥缺乏特異性的臨床表現(xiàn)，同時(shí)檢驗(yàn)者也難以掌握患者全面的臨床信息。因此，想結(jié)合臨床來判斷，是不可行的。
那我們檢驗(yàn)師傅，就只能坐以待斃，發(fā)出這樣模棱兩可的結(jié)果嗎？
當(dāng)然不會(huì)啦！這時(shí)就要請(qǐng)我們的法寶出場(chǎng)了。前面說了，MM等患者的生化結(jié)果出現(xiàn)異常，主要是單克隆免疫球蛋白沉淀，導(dǎo)致反應(yīng)吸光度異常變化。
而在生化儀上，我們可以查看每個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)曲線——它就如同一面照妖鏡，一旦這些異常蛋白在反應(yīng)中搗亂，那它們的斑斑劣跡，就難逃我們檢驗(yàn)人員的法眼。
下面就是一些反應(yīng)曲線的例子。先來看一看剛提到的假性高磷血癥的。從圖1中可以看到，正常血清磷的反應(yīng)曲線（A），是由兩段幾乎水平的直線組成。
而受到單克隆免疫球蛋白干擾的反應(yīng)曲線（B、C和D），則有不同程度的異常上升或下降。并且，這三條異常曲線起始階段的吸光度，就顯著大于正常曲線的。
因此，當(dāng)遇到這類可疑的結(jié)果時(shí)，通過觀察、對(duì)比正常與異常的反應(yīng)曲線，就很容易明確結(jié)果是否有問題。
假性高磷血癥是MM等患者中較為常見的一種結(jié)果。但有些諷刺的是，在一些MM患者中，卻會(huì)出現(xiàn)假性低磷血癥，這同樣需要注意和鑒別。[3]
除了以上的幾個(gè)項(xiàng)目外，單克隆免疫球蛋白還可能導(dǎo)致總
膽紅素假性偏高、肌酐假性降低、假性低
血糖、假性高鈣血癥等。[5]
那這些項(xiàng)目為何容易受到干擾呢？以最常受到干擾的磷和膽紅素為例，它們的檢測(cè)都是在強(qiáng)酸性、重金屬鹽存在下進(jìn)行的，導(dǎo)致單克隆免疫球蛋白容易沉淀出來。這與鹵水點(diǎn)豆腐是一個(gè)道理。
同時(shí)，在磷的檢測(cè)過程中會(huì)有鉬酸生成，它曾與鎢酸一樣，被用作沉淀劑來獲得去蛋白濾液（老一輩的檢驗(yàn)人會(huì)比較熟悉這一點(diǎn)）。[6]因此，磷成為最容易受單克隆免疫球蛋白干擾的項(xiàng)目，也在情理之中了。
而像各種酶法項(xiàng)目，通常是在較為溫和、接近生理pH值的條件下反應(yīng)的。所以，這些項(xiàng)目很少受到干擾。
不過，遇到這類假性結(jié)果，也并不總是壞事。因?yàn)榇祟惤Y(jié)果反過來也提示，患者很可能罹患MM等疾病。尤其是當(dāng)臨床診斷還不明確時(shí)，就更具價(jià)值了。這也算得上“因禍得福”了。
當(dāng)我們鑒別出受干擾的項(xiàng)目后，下一步就是考慮怎樣才能獲得正確的結(jié)果了。
消除單克隆免疫球蛋白對(duì)生化反應(yīng)的干擾，有以下的五種解決之道：
（1）稀釋標(biāo)本重測(cè)，通過稀釋可以降低或消除干擾。[7]但是稀釋倍數(shù)過大，會(huì)使結(jié)果處于最低檢測(cè)限以下，無法得到正確的結(jié)果。而稀釋倍數(shù)過小，則又不能抵消干擾。因此，可能需要一些試驗(yàn)，才能找到最佳的稀釋比。
（2）換用不同廠家的試劑進(jìn)行檢測(cè)。不同廠商的生化試劑，采用的檢測(cè)原理可能不同。
而即便是采用相同檢測(cè)原理的試劑盒，其中的各種組分也存在差異。這就導(dǎo)致對(duì)同一項(xiàng)目，可能A廠家的試劑會(huì)受到干擾，而B廠家的則不會(huì)。
（3）采用干化學(xué)法檢測(cè)。因?yàn)楦苫瘜W(xué)法中使用的干片的表層，可以截留大分子物質(zhì)。因此，干化學(xué)法完全不受單克隆免疫球蛋白的干擾。
（4）對(duì)存在干擾的血清，加入聚乙二醇6000溶液，離心使單克隆免疫球蛋白沉淀后。取上清液檢測(cè)，可以獲得可靠的結(jié)果。[8]
（5）對(duì)于受到干擾的兩點(diǎn)終點(diǎn)法項(xiàng)目，可以考慮忽略第一檢測(cè)點(diǎn)的吸光度。也就是把該項(xiàng)目近似為一點(diǎn)終點(diǎn)法，只取第二檢測(cè)點(diǎn)的吸光度（A）。
再根據(jù)下列公式：濃度=（A-空白吸光度）×校準(zhǔn)因子K，手動(dòng)計(jì)算結(jié)果。[9]當(dāng)然，這種方法是否完全可行，還需要更多的驗(yàn)證。
此外，大量單克隆免疫球蛋白的存在，還會(huì)使血清中的水含量降低，發(fā)生“電解質(zhì)排斥效應(yīng)”。從而在利用間接離子選擇性電極法檢測(cè)時(shí)，出現(xiàn)假性低鈉血癥等結(jié)果。[10]
免疫檢測(cè)
看到這里，做免疫檢測(cè)的小伙伴們，多半在偷著樂了，心里想：生化果然low啊，不光脂血、溶血和
黃疸等會(huì)干擾生化反應(yīng)?，F(xiàn)在又殺出個(gè)單克隆免疫球蛋白，還是我們大免疫靠譜啊。
且慢，免疫檢測(cè)也是不能幸免的。據(jù)報(bào)道，單克隆免疫球蛋白的存在，使一名患者的TSH出現(xiàn)了假性低值。[11]
而且，與生化檢測(cè)不同的是，發(fā)光免疫檢測(cè)并無類似反應(yīng)曲線的利器。因此，一旦出現(xiàn)此類假性結(jié)果，將很難及時(shí)發(fā)現(xiàn)。
而解決辦法只有結(jié)合其他相關(guān)結(jié)果和臨床信息進(jìn)行綜合判斷。對(duì)可疑的結(jié)果進(jìn)行系列稀釋，觀察結(jié)果是否呈線性?；蛘哂貌煌臋z測(cè)體系復(fù)查驗(yàn)證。
此外，單克隆免疫球蛋白的存在，也可能使血清的粘度增大。如果加樣系統(tǒng)不是十分完美的話，就會(huì)使生化儀和化學(xué)發(fā)光儀等出現(xiàn)加樣量不足，而導(dǎo)致錯(cuò)誤的低值結(jié)果。
過量單克隆免疫球蛋白的存在，還會(huì)在免疫球蛋白定量檢測(cè)中，出現(xiàn)前帶效應(yīng)（鉤狀效應(yīng)），導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)反常的低值。[7]
血常規(guī)
單克隆免疫球蛋白可導(dǎo)致一些血液分析儀測(cè)出的血紅蛋白濃度，出現(xiàn)假性偏高。這種情況下，反常偏高的MCH和MCHC是首要的線索。[12]
而糾正的方法有兩種，一種是離心后，檢測(cè)血漿層的“血紅蛋白”濃度，之后通過計(jì)算得到修正后的結(jié)果。而另一種是用等量鹽水置換血漿后，再行檢測(cè)。
MM等患者還可能產(chǎn)生冷球蛋白，它會(huì)使阻抗法的血小板、白細(xì)胞等結(jié)果出現(xiàn)假性高值。[13]此種情況下，適當(dāng)?shù)臏卦】梢越鉀Q。
輸血學(xué)檢測(cè)
MM患者由于單克隆免疫球蛋白增多，導(dǎo)致正常的免疫球蛋白合成不足，血型抗體含量減少。這會(huì)導(dǎo)致反定型中出現(xiàn)凝集較弱，發(fā)生正反定型不合的情況。
同時(shí)MM患者的紅細(xì)胞常呈緡錢狀聚集，其血清中也可能存在一些冷抗體，這些都可能干擾血型鑒定和交叉配血。[14]
結(jié)語
最后需要強(qiáng)調(diào)的是，單克隆免疫球蛋白的存在，并不一定總是會(huì)對(duì)某一項(xiàng)目造成干擾。而究竟會(huì)不會(huì)對(duì)某個(gè)項(xiàng)目產(chǎn)生干擾，產(chǎn)生多大程度的干擾，這些都是很難事先準(zhǔn)確預(yù)判的。[15]
眾所周知，生活中很少有完美的事物。不幸的是，在臨床檢驗(yàn)中也是同樣的情景。我們并沒有十全十美，不受任何干擾的檢測(cè)項(xiàng)目。這就注定了我們可能隨時(shí)會(huì)遭遇到各種假性的結(jié)果。
但是，只要我們具備一雙法眼和慧眼；以及最重要的是，擁有一顆仁心，善待每一份標(biāo)本和每一份結(jié)果。那么，我們一定能在不完美中達(dá)到完美。
健客－國(guó)家藥監(jiān)局認(rèn)證的合法網(wǎng)上藥店，致力于打造優(yōu)質(zhì)、低價(jià)、便捷的網(wǎng)上藥店和做最值得信賴的智慧健康服務(wù)平臺(tái)
關(guān)于健客 ｜
聯(lián)系我們
