雜交瘤技術(shù)的結(jié)晶1974年，英國劍橋大學(xué)的德國籍科學(xué)家GeorgesKohler博士和他的阿根廷同事CesarMilstein博士將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)綿羊紅細(xì)胞(SRBC)免疫的小鼠脾細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)在體外進(jìn)行兩種細(xì)胞融合，結(jié)果發(fā)現(xiàn)部分形成的雜交細(xì)胞既能繼續(xù)在體外培養(yǎng)條件下生長繁殖，又能分泌抗SRBC抗體。他們稱這種雜交細(xì)胞系為雜交瘤(Hybridoma)。這種雜交瘤細(xì)胞既具有骨髓瘤細(xì)胞能大量無限生長繁殖的特性，又具有抗體形成細(xì)胞合成和分泌抗體的能力。它們是由識(shí)別一種抗原決定簇的細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的均一性抗體，故稱之為單抗。只要抗原能引起小鼠的抗體應(yīng)答，研究者用雜交瘤技術(shù)就可獲得幾乎所有抗原的單抗。

　　單克隆抗體(McAb，簡稱單抗)通過特殊的識(shí)別系統(tǒng)辨別出腫瘤細(xì)胞致命的信息，識(shí)別它們特異的靶：腫瘤組織表面的蛋白結(jié)構(gòu)。這種選擇性地摧毀腫瘤細(xì)胞而健康細(xì)胞基本不受影響的靶向治療，為腫瘤患者的治療帶來了希望。

　　單抗的出現(xiàn)，給人們極大的振奮。當(dāng)時(shí)的《紐約時(shí)報(bào)》將它形容為“對抗腫瘤的青霉素”。這一溢美之辭似乎很快得到了見證，1982年，在接受單抗治療的淋巴瘤患者中第一次出現(xiàn)了腫瘤縮小的現(xiàn)象。從此，單抗的傳奇開始了。

　　初期臨床試驗(yàn)的失落

　　但是，科研的進(jìn)程似乎總是要遇到挫折的。在隨后近10年的時(shí)間中，研究者陸續(xù)開展了總共25項(xiàng)規(guī)模不一的臨床研究，但只治愈了3例患者，于是，對單抗臨床功效和應(yīng)用前景的懷疑開始產(chǎn)生并很快在該研究領(lǐng)域蔓延開來。

　　面對各種猜疑和困境，長期從事抗體研究的資深專家德國ScheringAG公司實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤學(xué)專家AndreasMenrad博士告誡同行，“將單抗應(yīng)用于臨床有很長而艱辛的路要走，不可急于求成”。Ce鄄sarMilstein博士則將當(dāng)時(shí)的研究困境歸結(jié)于對單抗確切的作用方式缺乏理解所致。1999年，CesarMilstein博士在對單抗的初期研究總結(jié)中認(rèn)識(shí)到，將單抗與毒素或放射性物質(zhì)結(jié)合后，注射入人體內(nèi)可能會(huì)產(chǎn)生更好的效果。但這些設(shè)想離將單抗成功地用于臨床還有相當(dāng)長的距離。

　　新技術(shù)推動(dòng)單抗復(fù)興

　　科研總是在迂回中找到前進(jìn)的方向。隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展和研究者堅(jiān)持不懈的努力，研究者終于找到了克服單抗臨床應(yīng)用困難的新方法。他們發(fā)現(xiàn)，研發(fā)低免疫源性單抗、改善人抗體反應(yīng)的技術(shù)是單抗藥物真正進(jìn)入臨床的關(guān)鍵。研究者嘗試用人類蛋白質(zhì)來開發(fā)第二代單抗，以便于將其副作用的風(fēng)險(xiǎn)降到最低。正如Menrad博士所說，單抗的人源化使其臨床問題的解決走上了正軌。此時(shí)的研究者在構(gòu)建人源化抗體時(shí)，也已經(jīng)學(xué)會(huì)怎樣避免丟失其關(guān)鍵的結(jié)合能力。這些新技術(shù)包括嵌合體技術(shù)、人源化技術(shù)、靈長目源技術(shù)以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)。利用這些技術(shù)，研究者可以從小鼠或噬菌體中生產(chǎn)出人源化抗體。

　　相對于第一代單抗，第二代單抗不同程度地降低了人體對外源蛋白的抗體反應(yīng)?；蚬こ碳夹g(shù)的發(fā)展可以消除單抗的免疫原性，使單抗藥物在臨床上達(dá)到高劑量、反復(fù)地應(yīng)用，從而達(dá)到治療效果而不至于引起人對其產(chǎn)生免疫反應(yīng)。隨著完全人源化抗體這一新技術(shù)在生物化學(xué)工業(yè)中的廣泛應(yīng)用，這一領(lǐng)域近年來的每5個(gè)新發(fā)現(xiàn)中就有一個(gè)是單抗。

　　臨床功效帶來廣闊前景

　　從上世紀(jì)90年代早期開始，有關(guān)單抗的臨床試驗(yàn)開始顯示出明顯功效。由美國Genentech/Idec公司研發(fā)的利妥昔單抗是一個(gè)重組的嵌合抗CD20的單抗，用于難治性的低分化或?yàn)V泡型非霍奇金氏B細(xì)胞淋巴瘤。它于1997年進(jìn)入臨床應(yīng)用，標(biāo)志著單抗正式進(jìn)入臨床治療階段，并開拓了治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤的新途徑。

　　目前，臨床用于治療惡性腫瘤的單抗主要有兩大類。其一是獨(dú)立的單抗可直接啟動(dòng)生長抑制信號(hào)或誘導(dǎo)凋亡，或間接激活宿主防御機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤的活性；其二是作為靶向制劑，通過偶聯(lián)物或連接物，單抗不具有誘導(dǎo)或激活作用，僅作為其他活性藥物的腫瘤組織靶向定位載體工具。通過單抗的靶向定位，在局部使代謝前體藥物活化發(fā)揮抗腫瘤的作用。當(dāng)前的研究進(jìn)展表明，單抗作為單獨(dú)治療藥物已被證明是有效的，多數(shù)情況下與常規(guī)藥物或者其它單抗聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用。

　　盡管單抗具有巨大的臨床應(yīng)用潛力，但目前臨床上單抗治療的費(fèi)用仍然過于昂貴。德國ScheringAG公司的抗體表達(dá)和純化專家DieterMoosmayer博士表示，發(fā)現(xiàn)新的或改進(jìn)已有的細(xì)胞株，可能滿足單抗的高效工業(yè)化培養(yǎng)和生產(chǎn)需求；而最為引人注目的發(fā)展方向是通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造植物或動(dòng)物，以便可以從莊稼或羊奶中獲取單抗。

（實(shí)習(xí)編輯：周小芳）