如今人們知道T細(xì)胞能夠識別并殺死腫瘤細(xì)胞，利用抗腫瘤活性為目的的治療方法被稱為癌癥免疫療法。可通過使用克隆特異性T細(xì)胞受體（TCR）來掃描出現(xiàn)在組織相容性復(fù)合體（MHC）上的小肽片段，從而實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞檢測異常腫瘤細(xì)胞。

許多人類腫瘤存在大量的DNA突變，過去研究證明了突變基因編碼的“腫瘤抗原”是當(dāng)前癌癥免疫療法發(fā)展的一個(gè)主要推動(dòng)力。由于新抗原的表達(dá)完全受限于腫瘤，發(fā)展增強(qiáng)腫瘤抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)的療法最為受歡迎。然而，由于腫瘤患者（如黑色素瘤患者和肺癌患者）中的絕大多數(shù)突變在預(yù)見頻率上不具共享性，這導(dǎo)致事實(shí)變得更加復(fù)雜，因此腫瘤對免疫系統(tǒng)出現(xiàn)排異大部分歸因?yàn)樗接锌乖?。如何開發(fā)新抗原特異自體T細(xì)胞產(chǎn)品？科學(xué)家需要新鮮的腫瘤材料，然而這種壯舉難以在多種腫瘤中實(shí)現(xiàn)。

Nature子刊：免疫療法中的液態(tài)活檢

在新研究中，研究人員表明在個(gè)體癌癥患者的血液中發(fā)現(xiàn)同樣的T細(xì)胞PD-1表達(dá)。通過這種方法，循環(huán)CD8+T細(xì)胞表達(dá)的PD-1不僅為腫瘤中T細(xì)胞抗腫瘤活性打開了窗口，還可作為腫瘤免疫療法中分離腫瘤反應(yīng)CD8+T細(xì)胞的標(biāo)志物。綠色細(xì)胞代表表達(dá)PD-1（對腫瘤細(xì)胞突變抗原做應(yīng)答）的腫瘤抗原特異性CD8+T細(xì)胞，藍(lán)細(xì)胞代表表達(dá)特異性抗原而非腫瘤抗原的CD8+T細(xì)胞。

近日，發(fā)表于《Nature Medicine》上的研究展現(xiàn)了一種獲取腫瘤抗原特異性T細(xì)胞的捷徑，研究人員表示可以從黑色素瘤患者的循環(huán)血液中將其準(zhǔn)確分離。這樣一來，他們?yōu)榫哂袕V闊應(yīng)用潛力的癌癥自體免疫細(xì)胞治療新思路打下了基礎(chǔ)。

在本次研究中，研究人員用以確定外周血腫瘤反應(yīng)T細(xì)胞群的方法聚焦于毒性CD8+ T細(xì)胞群。早前該研究團(tuán)隊(duì)曾表明黑色素瘤患者中對腫瘤侵潤性T細(xì)胞反應(yīng)的腫瘤富含表達(dá)PD-1的T細(xì)胞。為了測試外周血T細(xì)胞是否也有這樣的效應(yīng)，研究人員使用流式細(xì)胞儀分離癌癥患者血液中表達(dá)或不表達(dá)PD-1的CD8+T細(xì)胞群，同時(shí)研究人員通過深度測序以確定相應(yīng)患者的腫瘤特異性基因突變，將突變的基因片段在自體樹突狀細(xì)胞中進(jìn)行人為表達(dá)。

通過對抗原呈遞細(xì)胞和從患者血液中分離出來的不同CD8+T細(xì)胞群進(jìn)行共培養(yǎng)，研究人員發(fā)現(xiàn)血液中T細(xì)胞PD-1的表達(dá)（PD-1–expressing T cells），而不是（或很少）缺乏PD-1的T細(xì)胞對個(gè)體腫瘤中的抗原具有反應(yīng)性。有趣的是，作者還表明血細(xì)胞室中表達(dá)PD-1的T細(xì)胞的腫瘤抗原特異性與腫瘤本身PD-1表達(dá)T細(xì)胞非常相似。

本次研究共有四個(gè)黑色素瘤患者參與，研究人員從三個(gè)患者的血液中分離出突變特異的T細(xì)胞，該結(jié)果如何應(yīng)用至黑色素瘤的一般人群還有待觀察，因此更不用說用于其他類型的癌癥。然而，通過展示PD-1+T細(xì)胞子集中的腫瘤反應(yīng)，該研究引發(fā)了很多值得深思的問題。

首先，如何將這些觀察轉(zhuǎn)化到T淋巴細(xì)胞子集中：CD4+幫助T細(xì)胞？這種T細(xì)胞亞型有助于啟動(dòng)或保持T細(xì)胞應(yīng)答的持久性，包括針對腫瘤的T細(xì)胞。此外，與CD8+對應(yīng)，CD4+輔助T細(xì)胞可識別伴隨DNA突變而出現(xiàn)的腫瘤抗原，也曾有病例報(bào)告表明了這些細(xì)胞的潛在臨床效用性。因此，了解能否使用PD-1或其他的標(biāo)記物來識別血液腔中的腫瘤特異CD4+ T細(xì)胞顯得非常重要。

其次，作者觀察到了血液腔中腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞在其他標(biāo)記物或抗體缺乏時(shí)表達(dá)PD-1，那么問題來了，在這種情況下是什么使PD-1特殊？可以想象，循環(huán)T細(xì)胞PD-1的表達(dá)揭示了這些細(xì)胞曾經(jīng)遇到的一些激活信號，這也是將來的研究熱點(diǎn)。