3D培養(yǎng)牙周膜干細胞生物學(xué)特性的初步研究
摘要:研究指出,3D懸滴培養(yǎng)法是一種理想的PDLSCs培養(yǎng)方法。該文發(fā)表在2014年第05期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
近日,南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院研究人員發(fā)表論文,旨在研究懸滴法3D培養(yǎng)和2D貼壁培養(yǎng)的牙周膜干細胞(PDLSCs)生物學(xué)特性的差異。研究指出,3D懸滴培養(yǎng)法是一種理想的PDLSCs培養(yǎng)方法。該文發(fā)表在2014年第05期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
改良酶消化組織塊法分離培養(yǎng)PDLSCs,分別行2D貼壁培養(yǎng)及3D培養(yǎng)(3D培養(yǎng)按不同細胞接種數(shù)分為2.5×104,5×104及1×1053組),培養(yǎng)96h后分別用Live/Dead染色法分析細胞活性;流式細胞術(shù)檢測干細胞表面標記物;然后對2D、3D培養(yǎng)的PDLSCs進行礦化誘導(dǎo),茜素紅染色及熒光定量PCR檢測礦化結(jié)節(jié)形成情況以及礦化相關(guān)基因ALP和OPNmRNA的表達水平。
3D培養(yǎng)的PDLSCs可形成致密的細胞聚合物,2.5×104組PDLSCs細胞聚合物中心未見壞死現(xiàn)象,5×104組和1×105組則有較為明顯壞死現(xiàn)象;3D和2D培養(yǎng)的PDLSCs間充質(zhì)干細胞表面標記物的陽性表達率均無顯著差異(P>0.05);茜素紅染色和熒光實時定量PCR結(jié)果顯示,3D培養(yǎng)的PDLSCs形成礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量及其礦化相關(guān)基因ALPOPNmRNA的表達水平均顯著高于2D培養(yǎng)的細胞(P<0.05)。