朊毒體病

(一)發(fā)病原因
非常規(guī)慢病毒致病因子被認(rèn)為是一種淀粉樣蛋白原纖維(SAF)，構(gòu)成此種原纖維特殊蛋白顆粒被稱為朊病毒(PrP27-30)。這種慢病毒致病因子的性質(zhì)既有病毒性傳染發(fā)病特點(diǎn)，又有與常規(guī)病毒不同的理化特性和生物學(xué)特性。
理化特性表現(xiàn)為：
①具有高度抗各種消毒滅活能力;
②有抗高熱80～l00℃滅菌能力;
③具有抗紫外線和其他各種射線作用能力;
④常規(guī)電鏡看不到病毒，只有用特殊理化方法可發(fā)現(xiàn)原纖維和蛋白顆粒。
其生物學(xué)特性為：
①宿主間可傳遞的傳染性，潛伏期可長達(dá)數(shù)年或數(shù)十年;
②病理為變性改變，可見淀粉樣斑塊和膠質(zhì)增生，但無炎性反應(yīng)，亦無包涵體可見;
③無復(fù)發(fā)緩解病程，持續(xù)進(jìn)展直至死亡;
④不產(chǎn)生干擾素，不受干擾素影響，孵育過程中不受任何免疫抑制或免疫增強(qiáng)的影響。
現(xiàn)在已知此慢病毒致病因子：
①在高熱132℃60min可滅活;
②亦可在10%次氯酸鈉溶液內(nèi)浸泡1h以上或1N氫氧化鈉內(nèi)浸泡30min，反復(fù)3次即可滅活。
(二)發(fā)病機(jī)制
1982年P(guān)rusiner提出CJD系由一種特殊的，具有感染性質(zhì)的蛋白質(zhì)-朊蛋白(Prion Protein，PrP)所引起，從而否定了多年前Gajdusek所倡導(dǎo)的非尋常慢病毒感染學(xué)說。
PrP系一種單基因編碼的糖蛋白，由253個(gè)氨基酸組成(鼠為254個(gè)氨基酸組成)。位于人的第20號(hào)染色體短臂上，可譯框架由一個(gè)外顯子組成。在N的末端的附近由富有脯氨酸和甘氨酸的短肽5次反復(fù)。正常中樞神經(jīng)細(xì)胞表面也存在朊蛋白，稱此為PrPc。分子量為30～33KD，其空間構(gòu)象主要為α-螺旋狀結(jié)構(gòu)，蛋白酶K可以溶解。而異常PrP被稱作為PrPsc，PrPES或PrPCJD。與PrPc截然不同。分子量為27～30KD，其空間構(gòu)象近40%為β層狀折疊。PrPSC數(shù)次的集結(jié)，則形成直徑為10～20nm，長度100～200nm的物質(zhì)，這種物質(zhì)可能就是早期發(fā)現(xiàn)的羊瘙癢病相關(guān)原纖維(scrapic-associated-fiber，SAF)和朊蛋白質(zhì)粒(prion liposome)。它不能被蛋白酶K所消化。PrPSC大量沉積于腦內(nèi)，能摧毀自身的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，造成大腦廣泛的神經(jīng)細(xì)胞凋亡、脫失，形成海綿狀腦病。
PrPSC是怎樣進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，又是怎樣從正常的PrPc轉(zhuǎn)變?yōu)楫惓５腜rPSC，其詳細(xì)途徑和機(jī)制仍在研究中。不過，不同類型的CJD，其發(fā)生機(jī)制也不盡相同;一般來說，醫(yī)源性CJD為傳遞感染，即將被PrPSC污染的組織或器械，通過腦深部電極檢查、顱腦手術(shù)、硬腦膜移植、以及反復(fù)接受從垂體提取的生長激素或性激素肌注等，經(jīng)過長達(dá)數(shù)年至數(shù)十年的復(fù)制而發(fā)病。家族性CJD則為PrP基因突變，即自體PrPc自發(fā)的發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，從而產(chǎn)生大量PrPSC，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性。而散發(fā)性CJD可能為體細(xì)胞突變的結(jié)果。
這種異常朊蛋白在體內(nèi)沉積可受若干因素影響，而左右其發(fā)病及臨床表現(xiàn)。曾有人提出PrPSC是通過“內(nèi)源性神經(jīng)毒”的作用，才使神經(jīng)細(xì)胞大量凋亡和脫失。所謂“內(nèi)源性神經(jīng)毒”，包括興奮性氨基酸、各種細(xì)胞因子、自由基和一氧化氮等。PrPSC可能刺激神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分泌諸多的細(xì)胞因子、一氧化氮和自由基。自由基增多反過來又可以破壞神經(jīng)元的正常功能，而產(chǎn)生神經(jīng)細(xì)胞凋亡。不過，在諸多的影響發(fā)病因素當(dāng)中，起著主要、關(guān)鍵和直接作用的，莫過于基因的點(diǎn)突變和插入性突變。在散發(fā)性CJD中密碼子129(ATG-GTG)。180(GTC-ATC)，210(GAG-AAG)，208(CGC-CAC)位點(diǎn)突變時(shí)，直接影響CJD的臨床表現(xiàn)與經(jīng)過。這些事實(shí)，可以通過PrP基因檢測得到證實(shí)。
免疫組織化學(xué)染色，應(yīng)用于朊蛋白感染疾病的診斷，無疑是一很大的貢獻(xiàn)。以PrP抗血清為第一抗體，發(fā)現(xiàn)與證實(shí)PrP在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的存在與分布，并以此陽性結(jié)果區(qū)別于其他原因所引起的癡呆。早在1988年Kitamoto和Tateishi對(duì)30例CJD，11例GSS及51例非朊蛋白感染疾病所致的癡呆的腦組織切片，進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色，結(jié)果表明CJD僅59.0% ，GSS 100.0%為陽性。其余各類變性疾病，如Alzheimer病、進(jìn)行性核上麻痹、Huntington舞蹈病、脊小腦性共濟(jì)失調(diào)、Pick病等均為陰性。但是原有的染色方法只能在病程長于13個(gè)月的CJD腦切片中獲得陽性結(jié)果，事實(shí)是病程長于13個(gè)月的CJD，僅為該病的11%～61%，而病程較短的CJD仍為陰性。針對(duì)這一不足，近來有人成功地改進(jìn)了染色前的操作過程，名為水解高壓滅菌法(hydrolytic autoclaving)。這樣，即使病程短于13個(gè)月的CJD也能較好地呈現(xiàn)陽性結(jié)果。