纖維蛋白降解產(chǎn)物概述
在纖溶酶的作用下,纖維蛋白(原)可以降解產(chǎn)生不同分子量的碎片X、Y、D,E以及其他一些碎片,總稱為纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDP)。測定血漿(或尿液)中FDP含量的試驗通常有免疫電泳法、免疫擴散法、絮狀沉淀法、乳膠凝集(Fi)試驗、紅細(xì)胞凝集抑制試驗、葡萄球菌聚集試驗、反向血凝試驗以及酶聯(lián)免疫吸附試驗等等。
纖維蛋白降解產(chǎn)物正常值
(1)反向血凝試驗:小于10mg/L。
(2)葡萄球菌聚集試驗:玻片法為陰性,試管法為0~2mg/L。
纖維蛋白降解產(chǎn)物臨床意義
(1)反向血凝試驗:FDP含量增高,見于原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進。
(2)葡萄球菌聚集試驗:FDP含量增高,同反向血凝試驗。
纖維蛋白降解產(chǎn)物檢查方法
(1)反向血凝試驗:
①取靜脈血1ml,置小試管內(nèi),37℃溫育1h,分離血清。
②“V”型孔塑料板,第1孔開始直至第12孔,每孔加生理鹽水25μl。
③第1孔加受檢血清25μl,從第2孔開始依次作倍比稀釋。
④每孔致敏紅細(xì)胞加25μl。以后步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線制備。
⑤標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:
A.將已知含量的純纖維蛋白原以生理鹽水稀釋成10mg/L。
B.在“V”型孔塑料板上,從第2孔開始依次每孔加生理鹽水25μl。
C.將稀釋的纖維蛋白原溶液,第1、2孔各加25μl,并從第2孔開始依次作倍比稀釋至0.078mg/L。
D.取1支致敏紅細(xì)胞,用生理鹽水1ml作成懸液,每孔加25μl。
E.置微型振蕩器,振動30s,放置37℃,溫育30min。
F.室溫下放20min,觀察結(jié)果。
⑥計算:
A.標(biāo)準(zhǔn)計算:纖維蛋白原稀釋濃度為10、5、2.5……0.0078mg/L,致敏紅細(xì)胞出現(xiàn)無凝聚現(xiàn)象的前一個孔作反應(yīng)終點。如第7孔為終點,即抗體的敏感性所能檢測纖維蛋白原為0.15625mg/L。
B.標(biāo)本計算:找出凝集的終點,算出稀釋倍數(shù),再將0.15625mg/L乘稀釋倍數(shù)。
(2)葡萄球菌聚集試驗:
①玻片法:吸取菌液應(yīng)用液0.05ml,被檢血清0.05ml,在玻片上混勻,室溫下將玻片搖動2min,觀察細(xì)菌有無聚集現(xiàn)象。有聚集者為陽性,無聚集者為陰性。同時以生理鹽水0.05ml代替血清作對照。
②試管法:取被檢血清0.1ml,以生理鹽水作倍比稀釋,然后在每管中加入新鮮配制的菌液應(yīng)用液0.05ml,搖蕩200次/min共2min,立即在每管中加入生理鹽水0.5ml,于室溫中靜置30min,觀察結(jié)果。并與對照管比較,如有明顯細(xì)菌聚集,以發(fā)生聚集之最后一管作為反應(yīng)終點。
纖維蛋白降解產(chǎn)物注意事項
(1)反向血凝試驗:
①使用不同批號的致敏紅細(xì)胞,均須再次測定纖維蛋白原標(biāo)準(zhǔn)。
②保持塑料板干凈。
③同一批致敏紅細(xì)胞存放時間過久,抗體效價可能降低,則須每月定標(biāo)1次。
(2)葡萄球菌聚集試驗:
①被檢血清應(yīng)充分凝固并及時分離血清。
②因胸水、腹水等標(biāo)本含纖維蛋白原,故在檢測前加等量凝血酶(10u/ml),置37℃溫育30min,離心,取上清液試驗。