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其他沙門菌感染

其他沙門菌感染 的檢查:

沙門氏菌的鑒定

1.血象 外周血液白細胞數(shù)多在正常范圍,亦有增高或降低者。當(dāng)發(fā)生局部化膿性感染時,血液白細胞數(shù)多升高;而酷似傷寒型者則常降低。
2.細菌培養(yǎng) 胃腸炎型可從嘔吐物、糞便、可疑食物中培養(yǎng)、分離出病原菌。其中,以鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌、病牛沙門菌和鴨沙門菌感染較為常見。有研究表明,直腸拭子培養(yǎng)的陽性率較高。傷寒型、敗血癥型可從血液中培養(yǎng)、分離得病原體。一些病例可從局部化膿性病灶或分泌物中培養(yǎng)、分離出病原菌。對急性胃腸炎患者,可將其糞便標(biāo)本同時接種于強選擇性SS瓊脂培養(yǎng)基和弱選擇性麥康凱培養(yǎng)基上,置37℃過夜后再挑取不發(fā)酵乳糖的可疑菌落,接種于三糖鐵培養(yǎng)基上培養(yǎng),并作血清學(xué)分型。對已經(jīng)用抗菌藥物治療或處于疾病后期的患者,由于其糞便中的沙門菌數(shù)量已經(jīng)較少,用上述直接培養(yǎng)法有時會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。為了提高培養(yǎng)的陽性率,可采用0.5%亞硒酸肉湯或四硫磺酸鹽肉湯作為增菌劑,將1g左右的大便標(biāo)本接種于10ml增菌劑中,置37℃過夜,然后再轉(zhuǎn)種于上述培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。北京市防疫站介紹用磷酸鹽緩沖蛋白胨水作為增菌培養(yǎng)基,接種標(biāo)本后置37℃,培養(yǎng)5~6h即能達到明顯增菌的效果。不同血清型的沙門菌在各種選擇性增菌培養(yǎng)基中的生長能力有較大的差異,目前尚沒有一種理想的增菌培養(yǎng)基,使各種沙門菌在其中都能達到增菌的效果。如0.5%亞硒酸肉湯可對鼠傷寒沙門菌、乙型副傷寒沙門菌等有良好的增菌效果,而對豬霍亂沙門菌、羊流產(chǎn)沙門菌等卻有抑制生長的作用。在選擇性增菌培養(yǎng)時,提高培養(yǎng)溫度,達到43℃,培養(yǎng)18~24h,除傷寒沙門菌外,一般都能明顯增強增菌培養(yǎng)基的選擇效果,對大腸桿菌、變形桿菌、假單胞菌和不發(fā)酵乳糖的非致病菌都有較強的抑制作用,使在培養(yǎng)平板上出現(xiàn)較純的菌落,更易于作進一步菌種分離與鑒定。從血液、尿液和膿液等標(biāo)本中分離沙門菌的方法與從糞便標(biāo)本中分離沙門菌的方法基本相同。自血液中分離沙門菌可抽取病人的靜脈血5ml,立即接種于50~100ml的0.5%~1%葡萄糖膽汁肉湯或葡萄糖肉湯增菌液中,置37℃培養(yǎng),每天用鉑金環(huán)挑取增菌液接種于選擇性培養(yǎng)基或血液瓊脂培養(yǎng)基上,一般連續(xù)接種3天,必要時可連續(xù)接種2周。自尿液、痰液、漿膜腔液、膿液中分離沙門菌,可先將標(biāo)本離心,3000r/min,15min,取沉淀作直接培養(yǎng)分離或經(jīng)增菌培養(yǎng)后再作分離培養(yǎng)。國內(nèi)外用于分離沙門菌的培養(yǎng)基種類很多,但均無法從菌落形態(tài)上將沙門菌屬與變形桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬識別開來。鄧滌夷等研制了一種新的沙門菌分離培養(yǎng)基,乳糖賴氨酸十二烷基硫酸鈉瓊脂Ⅱ(LLSⅡ)培養(yǎng)基。沙門菌(除甲型副傷寒沙門菌外)均能在該培養(yǎng)基上生長,并能形成中心黑色邊緣紅色或橙黃色特征性菌落,而變形桿菌屬和枸櫞酸桿菌屬的細菌因產(chǎn)生硫化氫(H2S)的特征被抑制而形成黃色菌落,因而,從菌落形態(tài)上就可以把干擾沙門菌分離的產(chǎn)生硫化氫的非沙門菌區(qū)分開來。沙門菌的鑒定較為復(fù)雜。目前世界上已發(fā)現(xiàn)2000多個血清型,我國已發(fā)現(xiàn)201個血清型,新的血清型還在不斷地被發(fā)現(xiàn)。常先用抗血清作“O”抗原鑒定,再用抗血清作“H”抗原鑒定。近年來,還用噬菌體裂解試驗、DNA雜交和聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等技術(shù)作沙門菌的血清型鑒定。
3.血清學(xué)檢查 可用患者的血清與已知的沙門菌菌種制成的菌體抗原或亞單位抗原作凝集試驗或酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),以檢測血清中是否含有特異性抗體。一般于發(fā)病1~2周后即出現(xiàn)較高的抗體效價。若雙份血清檢查,第2次效價有4倍或以上增高者,可明確診斷為本病。但是,由于一般臨床檢驗室的沙門菌抗原種類有限,故較易出現(xiàn)漏檢現(xiàn)象。作某種沙門菌特異性抗原檢測更有助于明確診斷。如Keller等建立了2株能分泌腸炎沙門菌IgG抗體的小鼠雜交瘤細胞,用制備的單克隆抗體作ELISA,檢測標(biāo)本中的腸炎沙門菌,具特異性強、敏感度高之優(yōu)點。標(biāo)本中只要有10條病原菌即可呈檢測陽性。
4.分子生物學(xué)檢測 近年來,已有用DNA探針和PCR檢測沙門菌DNA的報道。而且,初步顯示PCR檢測有較高的特異性和敏感度。
如關(guān)節(jié)積液中可測得病原菌。

 

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