淋球菌性腹膜炎 的檢查：

淋球菌抗體檢測 氧化酶試驗

1.外周血象 白細(xì)胞計數(shù)>15×109/L，中性粒細(xì)胞增多。
2.細(xì)菌學(xué)檢查
(1)分泌物鏡檢：
①尿道(男性)或陰道分泌物鏡檢：可有大量紅色多形核白細(xì)胞。在有些細(xì)胞中吞噬有淋球菌。淋球菌為革蘭陰性，呈卵圓形或圓形，常成雙排列，兩菌接觸面扁平或稍凹。菌體長約0.7μm，寬約0.5μm。但兩菌大小可有差異。多數(shù)多形核白細(xì)胞中并不含淋球菌，但不少白細(xì)胞中常含有1對至數(shù)對，甚至數(shù)十對淋球菌。淋球菌常位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)(圖1)。
病期較長或經(jīng)過治療的淋病患者，其分泌物涂片中淋球菌數(shù)目較少，有時呈單個、四聯(lián)和八疊狀，且常位于細(xì)胞外(圖2)。
尿道分泌物標(biāo)本制作法：用浸有滅菌等滲鹽水的拭子揩洗尿道口，然后用手指由后向前擠出膿液，用棉拭子蘸取膿液后輕輕涂布于載玻片上。待自然干燥后加熱固定，染色(常用革蘭染色，也可用亞甲藍(lán)染色)，鏡檢。
②腹腔分泌物檢查：腹腔穿刺抽液，膿液呈黃白色、稀薄、量少，無臭味。涂片可找到淋病雙球菌或PCR球菌，DNA檢查陽性。
③注意事項：
A.淋病的診斷標(biāo)準(zhǔn)是可見“細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌”，故涂片宜動作輕柔，且棉拭子不得在玻片上滾動，以防止細(xì)胞破裂或變形，細(xì)菌從細(xì)胞內(nèi)逸出，造成診斷上的混淆。
B.涂片薄厚適當(dāng)。涂片過厚易造成脫色時間不足，使革蘭陰性菌也呈現(xiàn)紫色。大量染片時，最好用已知的革蘭陽性菌(如葡萄球菌)和陰性菌(如大腸埃希菌)作對比觀察。
C.固定涂片時，只需迅速通過火焰2～3次即可，避免加熱過度致細(xì)胞變形。一般涂片至手背之上以不感到太燙為宜。
(2)淋球菌培養(yǎng)：淋球菌培養(yǎng)是WHO推薦的淋病篩查的惟一方法，也是診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
常用血液瓊脂或巧克力瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)。為抑制雜菌，可加入適量抗菌物質(zhì)，如多黏菌素B(25μg/ml)和萬古霉素(3.3μg/ml)等。
淋球菌在血平皿上經(jīng)24～48h的培養(yǎng)后，可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色菌落，邊緣呈花瓣狀，直徑為0.5～1.0mm，用接種環(huán)觸之有黏性(圖3)。如繼續(xù)培養(yǎng)，菌落面積增大，表面變得粗糙，邊緣出現(xiàn)皺縮。若從菌落上取材作涂片，可見到菌的大小及染色的深度有差異，排列也不一致，約有25%的菌為典型的雙球菌，其他75%為單球菌、四聯(lián)形或八疊形。
使用液體培養(yǎng)基時，淋球菌生長于液體表面，稍有輕度混濁和顆粒沉淀。
培養(yǎng)標(biāo)本采集和送檢中應(yīng)注意：
①深部取材：從男性尿道取材時，應(yīng)將細(xì)小棉拭子伸入到尿道內(nèi)2～4cm處，取出帶有黏膜細(xì)胞的分泌物。從女性宮頸取材時，應(yīng)先用溫水濕潤擴(kuò)陰器(不要用液體石蠟等潤滑油)，然后將棉拭子插入宮頸管1.0～1.5cm，轉(zhuǎn)動并停留10～30s。有時為了提高陽性率，可同時取2份標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，但工作量也相應(yīng)增加。
②及時送檢、接種：淋球菌對環(huán)境變化敏感，耐寒、耐干的能力弱。因此，標(biāo)本離體后要立即送檢。若實驗室較遠(yuǎn)，可將標(biāo)本接種于Stuart或Amies運送培養(yǎng)基或浸入1%葡萄糖肉液浸中，途中保溫。
(3)氧化酶試驗：是淋球菌重要的初步診斷試驗之一。淋球菌在生長過程中能產(chǎn)生氧化酶。在經(jīng)24～48h培養(yǎng)的菌落上滴加氧化酶試劑(0.5%～1%鹽酸二甲基對苯二胺或鹽酸四甲基對苯二胺水溶液)，其菌落變成紫紅乃至黑色者為陽性反應(yīng)。但氧化酶試驗陽性者并不完全是淋球菌。
為保證氧化酶試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，操作中應(yīng)注意3個問題：
①氧化酶試劑要新鮮：正常的氧化酶試劑(鹽酸二甲基對苯二胺或鹽酸四甲基對苯二胺)為淡紅色。若試劑變成灰色或黑色，說明已經(jīng)失效。配制的試劑溶液需放在棕色玻璃瓶中避光保存，有效使用時間約1周。
②避免使用鐵質(zhì)接種環(huán)：氧化酶試劑與鐵離子接觸會產(chǎn)生紅色的化學(xué)變化，造成“陽性”假象，故淋球菌接種應(yīng)避免使用舊鐵絲或電爐絲等制成的接種環(huán)。試驗前亦應(yīng)檢查接種環(huán)與試劑接觸是否有紅色出現(xiàn)。
③需要保留菌種時，應(yīng)在菌落尚未完全變黑時挑出少許轉(zhuǎn)種。菌落一旦變黑，多數(shù)細(xì)菌即告死亡。
(4)過氧化氫酶試驗：淋球菌可產(chǎn)生過氧化氫酶。該酶能使過氧化氫迅速分解成水和氧氣，出現(xiàn)氣泡。用作淋球菌的初步鑒定。
①方法：用接種環(huán)挑取一菌落置于干凈載玻片上，取30%(V/V)過氧化氫溶液1滴加于可疑菌落表面，在1s內(nèi)有大量氣泡產(chǎn)生，為陽性反應(yīng)。如反應(yīng)遲緩或產(chǎn)生氣泡弱為陰性反應(yīng)。
②注意：某些非致病的奈瑟菌亦可為陽性反應(yīng)。陰性反應(yīng)可除外淋球菌。
(5)直接免疫熒光試驗：將熒光素標(biāo)記的淋球菌抗血清(單克隆抗體)滴于可疑菌上，遇到淋球菌(抗原)時，抗體與抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下可見到發(fā)蘋果綠色熒光的菌體。本法檢測快速、死菌亦可有陽性反應(yīng)。
(6)酶反應(yīng)：淋球菌具有特殊的酶類，能使某些酶的產(chǎn)色底物顯色，據(jù)此與其他奈瑟菌區(qū)別開來。臨床用于淋球菌鑒定。
選擇做腹部B超及腹平片檢查。