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淋球菌性腹膜炎別名:淋菌性腹膜炎

淋球菌性腹膜炎 的檢查:

淋球菌抗體檢測 氧化酶試驗

1.外周血象 白細胞計數(shù)>15×109/L,中性粒細胞增多。
2.細菌學檢查
(1)分泌物鏡檢:
①尿道(男性)或陰道分泌物鏡檢:可有大量紅色多形核白細胞。在有些細胞中吞噬有淋球菌。淋球菌為革蘭陰性,呈卵圓形或圓形,常成雙排列,兩菌接觸面扁平或稍凹。菌體長約0.7μm,寬約0.5μm。但兩菌大小可有差異。多數(shù)多形核白細胞中并不含淋球菌,但不少白細胞中常含有1對至數(shù)對,甚至數(shù)十對淋球菌。淋球菌常位于細胞質內(圖1)。
病期較長或經過治療的淋病患者,其分泌物涂片中淋球菌數(shù)目較少,有時呈單個、四聯(lián)和八疊狀,且常位于細胞外(圖2)。
尿道分泌物標本制作法:用浸有滅菌等滲鹽水的拭子揩洗尿道口,然后用手指由后向前擠出膿液,用棉拭子蘸取膿液后輕輕涂布于載玻片上。待自然干燥后加熱固定,染色(常用革蘭染色,也可用亞甲藍染色),鏡檢。
②腹腔分泌物檢查:腹腔穿刺抽液,膿液呈黃白色、稀薄、量少,無臭味。涂片可找到淋病雙球菌或PCR球菌,DNA檢查陽性。
③注意事項:
A.淋病的診斷標準是可見“細胞內革蘭陰性雙球菌”,故涂片宜動作輕柔,且棉拭子不得在玻片上滾動,以防止細胞破裂或變形,細菌從細胞內逸出,造成診斷上的混淆。
B.涂片薄厚適當。涂片過厚易造成脫色時間不足,使革蘭陰性菌也呈現(xiàn)紫色。大量染片時,最好用已知的革蘭陽性菌(如葡萄球菌)和陰性菌(如大腸埃希菌)作對比觀察。
C.固定涂片時,只需迅速通過火焰2~3次即可,避免加熱過度致細胞變形。一般涂片至手背之上以不感到太燙為宜。
(2)淋球菌培養(yǎng):淋球菌培養(yǎng)是WHO推薦的淋病篩查的惟一方法,也是診斷的“金標準”。
常用血液瓊脂或巧克力瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)。為抑制雜菌,可加入適量抗菌物質,如多黏菌素B(25μg/ml)和萬古霉素(3.3μg/ml)等。
淋球菌在血平皿上經24~48h的培養(yǎng)后,可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色菌落,邊緣呈花瓣狀,直徑為0.5~1.0mm,用接種環(huán)觸之有黏性(圖3)。如繼續(xù)培養(yǎng),菌落面積增大,表面變得粗糙,邊緣出現(xiàn)皺縮。若從菌落上取材作涂片,可見到菌的大小及染色的深度有差異,排列也不一致,約有25%的菌為典型的雙球菌,其他75%為單球菌、四聯(lián)形或八疊形。
使用液體培養(yǎng)基時,淋球菌生長于液體表面,稍有輕度混濁和顆粒沉淀。
培養(yǎng)標本采集和送檢中應注意:
①深部取材:從男性尿道取材時,應將細小棉拭子伸入到尿道內2~4cm處,取出帶有黏膜細胞的分泌物。從女性宮頸取材時,應先用溫水濕潤擴陰器(不要用液體石蠟等潤滑油),然后將棉拭子插入宮頸管1.0~1.5cm,轉動并停留10~30s。有時為了提高陽性率,可同時取2份標本進行培養(yǎng),但工作量也相應增加。
②及時送檢、接種:淋球菌對環(huán)境變化敏感,耐寒、耐干的能力弱。因此,標本離體后要立即送檢。若實驗室較遠,可將標本接種于Stuart或Amies運送培養(yǎng)基或浸入1%葡萄糖肉液浸中,途中保溫。
(3)氧化酶試驗:是淋球菌重要的初步診斷試驗之一。淋球菌在生長過程中能產生氧化酶。在經24~48h培養(yǎng)的菌落上滴加氧化酶試劑(0.5%~1%鹽酸二甲基對苯二胺或鹽酸四甲基對苯二胺水溶液),其菌落變成紫紅乃至黑色者為陽性反應。但氧化酶試驗陽性者并不完全是淋球菌。
為保證氧化酶試驗結果的準確性,操作中應注意3個問題:
①氧化酶試劑要新鮮:正常的氧化酶試劑(鹽酸二甲基對苯二胺或鹽酸四甲基對苯二胺)為淡紅色。若試劑變成灰色或黑色,說明已經失效。配制的試劑溶液需放在棕色玻璃瓶中避光保存,有效使用時間約1周。
②避免使用鐵質接種環(huán):氧化酶試劑與鐵離子接觸會產生紅色的化學變化,造成“陽性”假象,故淋球菌接種應避免使用舊鐵絲或電爐絲等制成的接種環(huán)。試驗前亦應檢查接種環(huán)與試劑接觸是否有紅色出現(xiàn)。
③需要保留菌種時,應在菌落尚未完全變黑時挑出少許轉種。菌落一旦變黑,多數(shù)細菌即告死亡。
(4)過氧化氫酶試驗:淋球菌可產生過氧化氫酶。該酶能使過氧化氫迅速分解成水和氧氣,出現(xiàn)氣泡。用作淋球菌的初步鑒定。
①方法:用接種環(huán)挑取一菌落置于干凈載玻片上,取30%(V/V)過氧化氫溶液1滴加于可疑菌落表面,在1s內有大量氣泡產生,為陽性反應。如反應遲緩或產生氣泡弱為陰性反應。
②注意:某些非致病的奈瑟菌亦可為陽性反應。陰性反應可除外淋球菌。
(5)直接免疫熒光試驗:將熒光素標記的淋球菌抗血清(單克隆抗體)滴于可疑菌上,遇到淋球菌(抗原)時,抗體與抗原結合,在熒光顯微鏡下可見到發(fā)蘋果綠色熒光的菌體。本法檢測快速、死菌亦可有陽性反應。
(6)酶反應:淋球菌具有特殊的酶類,能使某些酶的產色底物顯色,據(jù)此與其他奈瑟菌區(qū)別開來。臨床用于淋球菌鑒定。
選擇做腹部B超及腹平片檢查。

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  • 秦少飛 秦少飛 主治醫(yī)師
    河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院安平分院
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