血清白細(xì)胞介素8概述
IL-8是一種低分子量(6~8kD)的多肽,單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞受LPS、TNF或IL-1刺激后都可產(chǎn)生這種細(xì)胞因子。IL-8的特征性生物效應(yīng)是趨化和激活中性粒細(xì)胞,因而參與中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的組織損傷。在許多慢性炎癥性疾病,如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病等,病變局部或血清IL-8產(chǎn)生異常,定量檢測(cè)IL-8對(duì)于研究這些疾病的發(fā)生、發(fā)展及指導(dǎo)治療均有重要意義。
血清白細(xì)胞介素8正常值
ELISA8.1~21.3μg/L。
血清白細(xì)胞介素8臨床意義
升高:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎病綜合征、出血熱。
結(jié)果偏高可能疾?。?br />
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的腎損害、流行性出血熱、老年人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎病綜合征。
血清白細(xì)胞介素8檢查方法
(1)包被兔抗人IL-8IgG(1μg/ml),以碳酸鹽緩沖液稀釋,加入酶標(biāo)板各孔中,50μl/孔。4℃過夜。
(2)封閉 用洗液(PBS-0.05% Tween20)洗板3次,加入封閉液(含2%牛血清白蛋白的PBS)200μl/孔,37℃2h。
(3)加樣。加入待檢樣品和系列稀釋的rIL-8標(biāo)準(zhǔn)品,50μl/孔,所有樣品及各稀釋度標(biāo)準(zhǔn)品均為復(fù)孔或三孔,37℃1h。
(4)洗板3次,加入生物素化兔抗IL-8IgG(35μg/ml)50μl/孔,37℃溫育30min。
(5)洗板3次,加入1∶5000稀釋的親和素-HRP,100μl/孔,37℃溫育30min。
(6)洗板3次,加入底物液100μl/孔,室溫顯色5min,每孔加入50μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(7)用酶標(biāo)儀測(cè)A490nm。
血清白細(xì)胞介素8注意事項(xiàng)
該法特異性強(qiáng),敏感度高。最小檢出量約為100pg/ml,重復(fù)性好。其關(guān)鍵在于制備高效價(jià),高純度的兔抗IL-8 IgG。