血紅蛋白F細胞酸洗脫染色試驗概述
HbF的抗堿性及抗酸性都較正常血紅蛋白(HbA)為強,因此,血片經酸洗脫后,含HbF的紅細胞因抗酸而不被脫色,能被伊紅染成紅色。含HbA或只含及少量HbF的紅細胞則被酸洗脫,僅留下紅細胞膜的空影。
血紅蛋白F細胞酸洗脫染色試驗正常值
著色細胞:0-<1%?!?br /> 新生兒:2/3。
血紅蛋白F細胞酸洗脫染色試驗臨床意義
(1) 多數(shù)紅細胞染成紅色:β-地中海貧血重癥型。
(2) 少數(shù)紅細胞染成紅色:β-地中海貧血輕癥型、再生障礙性貧血、溶血性貧血?!?br />
(3) 染色深:遺傳性HbF增多癥純合子型。
(4) 染色淺:遺傳性HbF增多癥雜合子型?!?br />
(5) 染色深淺不均勻:β-地中海貧血輕癥型。
血紅蛋白F細胞酸洗脫染色試驗檢查方法
1、按常規(guī)法制備血涂片,自然干燥1h,再用80%乙醇固定5min(檸檬酸鹽抗凝血在4℃冰箱內保存3天可以使用),水洗待干。
2、將固定后血膜放37℃,pH3.3的磷酸鹽檸檬酸緩沖液中,保溫浸洗5min。
3、沖洗干燥后,在蘇木素染色液中染白細胞1min,以免誤認為陽性紅細胞。
4、水洗后,用伊紅染液染紅細胞1min,再水洗,干后鏡檢。
5、在油鏡下,含有Hb F的紅細胞被伊紅染液染成鮮紅色,為陽性紅細胞;僅留下淡影的細胞膜為陰性紅細胞。計數(shù)1000個紅細胞中陽性紅細胞所占百分率。
血紅蛋白F細胞酸洗脫染色試驗注意事項
1、血片制成后,在2h內染色,否則可出現(xiàn)假陽性反應。要求涂片薄,細胞平鋪分散。
2、緩沖液的pH、溫度、洗脫時間應嚴格控制,否則影響測定結果。
3、也可用稀釋瑞氏染色液作對比染色。