脫氧核糖核酸染色正常值
幼稚血細(xì)胞脫氧核糖核酸顆粒堆積、聚集、染色深、成熟血細(xì)胞脫氧核糖核酸顆粒分布均勻,細(xì)小,染色淺。
脫氧核糖核酸染色臨床意義
(1)鑒別細(xì)胞的成熟程度,如小原粒細(xì)胞與成熟淋巴細(xì)胞的區(qū)別,小原粒細(xì)胞染色淺、核仁明顯;淋巴細(xì)胞染色深?!?br /> (2)鑒別急性白血病的類型,原淋巴細(xì)胞反應(yīng)較強,染色質(zhì)染成粗顆粒;原粒細(xì)胞核反應(yīng)減弱,染色質(zhì)呈較淡的細(xì)顆粒狀;原單核細(xì)胞反應(yīng)最弱,染色質(zhì)呈纖細(xì)網(wǎng)狀,染色較淺?!?br /> (3)鑒別巨幼紅細(xì)胞與正常紅細(xì)胞,巨幼紅細(xì)胞核染色淡呈細(xì)網(wǎng)狀,正常紅細(xì)胞核染色深呈粗顆粒至塊狀。
脫氧核糖核酸染色檢查方法
(1)新鮮抗凝血標(biāo)本,用比重1.077的淋巴細(xì)胞分離液作密度梯度分離,取淋巴細(xì)胞層細(xì)胞離心涂片,空氣干燥。或不作細(xì)胞分離,直接涂片。
(2)涂片用過氧化氫-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻斷細(xì)胞的內(nèi)源性過氧化酶。
(3)涂片在0.1mol/L磷酸鹽緩沖液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以減少抗體非特異性結(jié)合。
(4)滴加兔抗牛TdT抗體,37℃保溫30min。
(5)滴加羊抗兔IgG抗體,37℃保溫30min。
(6)滴加PAP免疫復(fù)合物,37℃保溫30min。
(7)將涂片浸入DAB溶液,室溫作用5~10min。
(8)水洗5min,干后鏡檢,或用哈氏蘇木素染液復(fù)染胞核10min。
脫氧核糖核酸染色注意事項
操作中4~6每次均需用0.1mol/L磷酸鹽緩沖液沖洗2次,以免沉渣出現(xiàn)。浸入DAB溶液作用應(yīng)避光操作。DAB為致癌劑應(yīng)注意皮膚防護(hù)。