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隱球菌病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)概述
新生隱球菌(cryptococus neoformans)系半知菌亞門、芽生菌綱、隱球酵母目、隱球酵母科、隱球酵母菌屬中真菌。本屬中雖種類較多,目前認(rèn)為主要病原真菌為新生隱球菌。本菌廣泛分布于自然界,屬土壤真菌,但常寄生于鳥類特別是鴿子的糞便中。新生隱球菌易侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),原發(fā)灶主要為肺,少有皮膚或粘膜?;颊咧杏?0%以上是與白血病、何杰金氏病、糖尿病以及艾滋病有關(guān),另外臟器移植者也易感染。細(xì)胞免疫功能低下是誘發(fā)本病的重要原因。
隱球菌病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)正常值
陰性。
隱球菌病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)臨床意義
陽(yáng)性新型隱球菌感染(中樞神經(jīng)系統(tǒng)和全身性)。
結(jié)果陽(yáng)性可能疾?。弘[球菌病。
隱球菌病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢查方法
(1)補(bǔ)體和溶血素的滴定。
①取補(bǔ)體1ml,加BBS 9ml,依次稀釋成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同時(shí)取50%的溶血素 0.2ml,加BBS 9.8ml,即為1∶100的溶血素,然后繼續(xù)稀釋成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。
②采取方陣排列試管,縱行各管加不同濃度的補(bǔ)體0.1ml,橫排各管加溶血素0.1ml(皆應(yīng)從最高稀釋度加起)混勻后,各管加BBS 0.2ml,補(bǔ)體和溶血素對(duì)照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊紅細(xì)胞0.1ml。各管總量為0.5ml,搖勻,放37℃水箱中30min,觀察結(jié)果。
以完全溶血的補(bǔ)體和溶血素最高稀釋度為各自的單位。上表(表1)中溶血素1∶3200為一個(gè)溶血素單位,補(bǔ)體1∶80為一個(gè)補(bǔ)體單位。在實(shí)際應(yīng)用時(shí),溶血素用2u(3200÷2=1600),補(bǔ)體用2.5u(80÷2.5=32)。
(2)正式試驗(yàn):
①用V型微量反應(yīng)板操作,每份標(biāo)本作一個(gè)試驗(yàn)孔,一個(gè)血清對(duì)照孔。各孔內(nèi)先加BBS 0.025ml。
②用稀釋棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋轉(zhuǎn)后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀釋。
(3)結(jié)果判斷:凡對(duì)照組各管的結(jié)果應(yīng)符合以下情況,否則應(yīng)重做。
補(bǔ)體對(duì)照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊紅細(xì)胞對(duì)照管:4??贵w對(duì)照管:0。陰性對(duì)照管;1∶2~1∶256=0。陽(yáng)性對(duì)照管:同一份陽(yáng)性血清,每次結(jié)果應(yīng)一致。
當(dāng)各測(cè)定管反應(yīng)最強(qiáng)一管仍為±報(bào)告可疑,1~4報(bào)告陽(yáng)性。如測(cè)定管和血清對(duì)照管均抗補(bǔ)體,全部測(cè)定管皆為0,報(bào)告陰性。
檢查抗體的方法與檢查抗原的方法一樣,只是改用4個(gè)單位已知抗原,藉以測(cè)定被檢血清。
隱球菌病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)注意事項(xiàng)
有人認(rèn)為隱球菌的出現(xiàn)對(duì)艾滋病的診斷有一定參考價(jià)值。