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固相酶免疫測(cè)定技術(shù)

固相酶免疫測(cè)定技術(shù)概述

固相酶免疫測(cè)定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面(包被),并保持其免疫活性;用酶標(biāo)記(另一種)抗原或抗體,保留其免疫活性和酶活性;在測(cè)定時(shí),把待測(cè)標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng);用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例;加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化顯色,故可根據(jù)顏色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,具有放大反應(yīng)的效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。根據(jù)測(cè)定對(duì)象的不同,ELISA有多種反應(yīng)類(lèi)型。 

固相酶免疫測(cè)定技術(shù)正常值

  • 不同項(xiàng)目檢測(cè)的正常值不同,一般小于一定的范圍內(nèi)?;蛘呤顷幮越Y(jié)果。 

固相酶免疫測(cè)定技術(shù)臨床意義

  • 異常結(jié)果:酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的。因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。 
    需要檢查的人群:一般是免疫力低下或者出現(xiàn)有關(guān)免疫學(xué)疾病的患者需要檢查。 

固相酶免疫測(cè)定技術(shù)檢查方法

  • 測(cè)量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測(cè)的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測(cè)定。其方法簡(jiǎn)單,方便訊速,特異性強(qiáng)。 

固相酶免疫測(cè)定技術(shù)注意事項(xiàng)

  • 一般要求早晨空腹檢查,禁忌暴飲暴食和辛辣食品后檢查。
    在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)1周測(cè)定的需低溫冰存。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。 

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