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乳糜微粒

乳糜微粒概述

乳糜微粒是人血漿中最大的脂蛋白顆粒,CM是多數(shù)膳食TG從小腸吸收部位輸送至體循環(huán)。CM清除速度快,半衰期為10min,正常人空腹12h后不能檢出,脂蛋白電泳時(shí)CM位于原點(diǎn)。需注意的是做血清脂蛋白電泳時(shí)樣品應(yīng)新鮮,不可凍存。 

乳糜微粒正常值

  • 陰性。 

乳糜微粒臨床意義

  • 陽性:高脂蛋白血癥Ⅰ型、高脂蛋白血癥Ⅴ型。 

乳糜微粒檢查方法

  • 靜脈抽血。 

乳糜微粒注意事項(xiàng)

  • (1)免疫透射比濁法:
    ①關(guān)于抗血清:比濁測(cè)定與其他方法相比對(duì)抗血清的要求更高。比濁法以用多克隆抗體為宜??寡逯斜仨毑缓s抗體。必須十分重視從人血清中提取的apoA-Ⅰ達(dá)到免疫純、色譜純與電泳純,這不是一般實(shí)驗(yàn)室都能做到的??寡逍r(jià)(滴度)不可低于16。目前國(guó)內(nèi)某些商品試劑中,apoA-Ⅰ抗血清效價(jià)極低,選購試劑盒時(shí)必須注意。如果沒有在選購前鑒定抗血清質(zhì)量的經(jīng)驗(yàn),應(yīng)請(qǐng)有條件的單位鑒定之。
    ②上法中標(biāo)本(血清)稀釋200倍是為了便于手工操作(加樣100μl),如有精密加樣器,可作20倍稀釋(用10μl)。為了適合不同實(shí)驗(yàn)室的條件(如不同類型的自動(dòng)化儀器),作適當(dāng)修改時(shí)應(yīng)注意抗原抗體的比例,必須十分注意反應(yīng)體系中不可有抗原過量,線性上限不可低于2.5g/L。換言之,抗血清用量必須充裕,否則標(biāo)本中apoA-Ⅰ高水平時(shí)測(cè)出結(jié)果偏低。目前國(guó)內(nèi)某些商品試劑盒不但抗血清效價(jià)過低,操作中所定標(biāo)本用量又過大(如3~5μl),抗體明顯不足,測(cè)出結(jié)果必然不準(zhǔn)確。
    ③為了達(dá)到準(zhǔn)確測(cè)定的目的,apoA-Ⅰ與B比濁測(cè)定(終點(diǎn)法)中必須作校準(zhǔn)曲線計(jì)算結(jié)果。一定范圍(低標(biāo)本用量)濃度(X)與濁度(Y)基本上成直線關(guān)系,直線回歸計(jì)算出在Y軸上有一定截距(A值<0.1),所以用單點(diǎn)校準(zhǔn)計(jì)算結(jié)果偏差較大,使測(cè)出結(jié)果不能準(zhǔn)確反映濃度的高低(高的偏低,低的偏高)。千萬不要因?yàn)閱吸c(diǎn)法簡(jiǎn)便而忽略了測(cè)定的準(zhǔn)確性。無論用何種自動(dòng)化儀器,必須先試作校準(zhǔn)曲線。如果在所用儀器及特定條件下反復(fù)測(cè)試,回歸線的截距不明顯時(shí),才能采用單點(diǎn)校準(zhǔn)法。標(biāo)本用量在3~5&mu;l時(shí),即使加大抗血清用量,濃度與濁度也不成直線關(guān)系,只能用曲線直線化轉(zhuǎn)換后計(jì)算。
    ④主要干擾因素是血清本身的混濁(如高脂血清),用超離心或脂肪酶水解等標(biāo)本預(yù)處理方法都不實(shí)用。用表面活性劑消濁的作用也有限,所以在測(cè)定中必須作標(biāo)本空白管。除了自動(dòng)分析中可采用兩點(diǎn)法外,手工法用單一試劑而不扣除標(biāo)本空白的做法是錯(cuò)誤的。為了減少基質(zhì)效應(yīng)對(duì)濁度反應(yīng)的影響,必須用定值血清作校準(zhǔn)物。此外,塵埃粒子、比濁皿劃痕等干擾也必須排除。
    ⑤有的商品試劑盒(包括某些進(jìn)口產(chǎn)品)所附校準(zhǔn)血清定值不準(zhǔn)確,是誤差的重要來源。
    (2)火箭電泳法:
    ①抗原稀釋倍數(shù)與抗血清用量的選擇,應(yīng)以火箭峰清晰、校準(zhǔn)曲線斜率適中并成直線為宜。本法同時(shí)測(cè)定apoA-Ⅰ與apoB,應(yīng)調(diào)整兩種抗血清用量,使二者峰高有區(qū)別,apoB峰高不小于1cm。
    ②不同種類來源的抗血清(如兔與羊),在等效價(jià)的情況下進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果會(huì)有差異。apoA-Ⅰ測(cè)定以兔抗血清為好。用兔血清時(shí)峰形尖細(xì),而羊血清所產(chǎn)生的峰粗,峰尖圓鈍,有時(shí)在峰頂前出現(xiàn)虛影。校準(zhǔn)血清所作校準(zhǔn)曲線斜率也不同。但不論用何種抗血清,定量結(jié)果差別不大。
    ③在一定條件下電泳,不同稀釋度校準(zhǔn)血清的峰高不會(huì)有明顯變動(dòng),校準(zhǔn)曲線斜率基本一致。如標(biāo)本峰高超出校準(zhǔn)曲線范圍時(shí),應(yīng)調(diào)整標(biāo)本稀釋倍數(shù)后重測(cè)。板間CV通常小于5%。
    ④火箭電泳結(jié)果可以用染色法或直接肉眼觀察可見的火箭峰。前者用標(biāo)本少,節(jié)省抗血清,但如適當(dāng)增加標(biāo)本及抗血清用量,不染色更為方便。所用瓊脂糖應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)電滲或低電滲的,凝膠中加入適量葡聚糖或聚乙二醇可使火箭峰更清晰。
    ⑤火箭峰的測(cè)量可以計(jì)算面積或峰高,面積是峰高乘以峰寬(峰半高處的寬度)。測(cè)量精度最好能達(dá)0.1mm。須用機(jī)械或電子放大設(shè)備。標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)峰高以1~4cm為宜。
    ⑥本法適用于少量標(biāo)本分析。也適用于apoAⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E及Lp(a)測(cè)定。 

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