糖鏈抗原242概述
糖類抗原CA242(CA242)是從人結(jié)直腸癌細(xì)胞系COLO205單克隆抗體發(fā)現(xiàn)的,也是一種唾液酸化的鞘糖脂抗原,和CA50共同表達(dá)。其生化本質(zhì)為唾液酸化的糖類結(jié)構(gòu),屬于粘蛋白。在正常胰腺、結(jié)腸粘膜中存在,但表達(dá)極低。糖鏈抗原CA242是消化系統(tǒng)尤其是胰腺癌、結(jié)直腸癌的腫瘤標(biāo)志物。胰腺癌、結(jié)直腸癌患者該指標(biāo)明顯升高。它的Cutoff值一般在20KU/L,惡性腫瘤時(shí)檢出率可達(dá)60--85%,且含量較高。另外,某些胃癌患者該指標(biāo)也會(huì)升高。
糖鏈抗原242正常值
糖類抗原CA242(CA242)<12kU/L。
糖鏈抗原242臨床意義
(1)肺癌患者血清CA242水平常明顯增高,CA242水平與臨床分期、腫塊大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),且在肺腺癌時(shí)CA242水平明顯高于鱗癌及小細(xì)胞肺癌。手術(shù)治療后CA242顯著下降,復(fù)發(fā)時(shí)再次升高。CA242對(duì)肺腺癌具有一定的診斷價(jià)值,動(dòng)態(tài)觀察CA242含量變化對(duì)肺癌患者病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)價(jià)及預(yù)后判斷具有一定的臨床意義。
(2)血清CA242水平增高還可見于胃癌、胰腺癌、大腸癌及卵巢癌等惡性腫瘤,且血清CA242檢測(cè)有助于上述腫瘤的病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)價(jià)及預(yù)后判斷。
(3)在慢性結(jié)腸炎、慢性胰腺炎、膽囊炎及膽結(jié)石患者亦可有血清CA242水平的升高,但陽性率較低。
糖鏈抗原242檢查方法
本法分三個(gè)步驟,即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測(cè)定。
(1)抗原與抗體反應(yīng):將標(biāo)本(非標(biāo)記抗原)、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi),置室溫(15~30℃)作用24h,使其充分競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。
(2)B、F分離:分離技術(shù)多種多樣,常用沉淀法。
①第二抗體沉淀法:又稱雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉,一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結(jié)果。
②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài),水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價(jià)廉、分離快速,缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多,分離不完全。
③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn),且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。
④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。
(3)放射性強(qiáng)度測(cè)定:B和F分離后,即可測(cè)定其放射性強(qiáng)度。測(cè)量?jī)x器有兩類:液體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)β射線)和晶體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)γ射線)。計(jì)數(shù)單位是探測(cè)器輸出的電脈沖數(shù),單位為cpm(脈沖數(shù)/min)。
每次測(cè)定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo),以測(cè)到的相應(yīng)放射性強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強(qiáng)度可任選B或F,亦可采用計(jì)算值B/B+F、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測(cè)定,取其平均值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。
糖鏈抗原242注意事項(xiàng)
(1)胰腺、結(jié)直腸、肝、胃癌的陽性率分別為86.6%、62%、44.9%和34.60%。
(2)正常人的假陽性率為4%。