促甲狀腺激素釋放激素概述
促甲狀腺激素釋放激素(thyrotropin-releasing hormone,TRH)由下丘腦分泌的一種三肽,其生理功能是通過(guò)一系列途徑使垂體前葉細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的TSH釋放,血中TSH及T3、T4含量增高。測(cè)定血漿TRH的同時(shí)測(cè)定TSH、T3、T4,這樣可以了解甲狀腺病變的病因,病變發(fā)生在甲狀腺還是垂體或下丘腦。TRH已由人工合成成功,并應(yīng)用于臨床。
促甲狀腺激素釋放激素正常值
(19.8±3.1)pg/ml。
促甲狀腺激素釋放激素臨床意義
(1)原發(fā)性甲狀腺功能低下TRH增高,TSH也升高。重癥時(shí),血漿TRH達(dá)3200pg/ml。
(2)繼發(fā)性甲狀腺功能低下可由垂體及下丘腦病變引起。垂體性甲低如臨床上常見(jiàn)的席漢綜合征,TRH升高也可正常。下丘腦性甲低血漿TRH分泌減少,整個(gè)下丘腦-垂體-甲狀腺軸系統(tǒng)功能低下。
(3)甲狀腺功能亢進(jìn)時(shí)TRH正?;蚪档?,也可升高。
(4)亞急性甲狀腺炎早期血TRH正常,后期是甲低時(shí)升高。
(5)先天性單獨(dú)TRH缺乏癥臨床罕見(jiàn)。
(6)下丘腦功能紊亂時(shí)有多種激素的改變,有時(shí)有類(lèi)似下丘腦件甲低的改變。
促甲狀腺激素釋放激素檢查方法
本法分三個(gè)步驟,即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測(cè)定。
(1)抗原與抗體反應(yīng):將標(biāo)本(非標(biāo)記抗原)、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi),置室溫(15~30℃)作用24h,使其充分競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。
(2)B、F分離:分離技術(shù)多種多樣,常用沉淀法。①第二抗體沉淀法:又稱(chēng)雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉,一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無(wú)因素可在一定程度上影響結(jié)果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài),水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價(jià)廉、分離快速,缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多,分離不完全。③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn),且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。
(3)放射性強(qiáng)度測(cè)定:B和F分離后,即可測(cè)定其放射性強(qiáng)度。測(cè)量?jī)x器有兩類(lèi):液體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)β射線(xiàn))和晶體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)γ射線(xiàn))。計(jì)數(shù)單位是探測(cè)器輸出的電脈沖數(shù),單位為cpm(脈沖數(shù)/min)。
每次測(cè)定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖,以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo),以測(cè)到的相應(yīng)放射性強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強(qiáng)度可任選B或F,亦可采用計(jì)算值B/BF、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測(cè)定,取其平均值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。
促甲狀腺激素釋放激素注意事項(xiàng)
由于TRH測(cè)定技術(shù)要求較高,臨床多采用TRH興奮試驗(yàn),通過(guò)檢測(cè)TSH來(lái)替代TRH測(cè)定。