血清脂蛋白和血清脂蛋白電泳概述

脂蛋白電泳主要用于高脂蛋白血癥分型，也有助于了解冠心病的血脂狀態(tài)，更好地指導(dǎo)臨床診療工作。

• 檢查部位 其他
• 科室 內(nèi)科
• 相關(guān)疾病 高脂蛋白血癥
• 相關(guān)癥狀

血清脂蛋白和血清脂蛋白電泳正常值

• 醋酸纖維薄膜電泳法
  乳糜微粒0g/L(0mg/dl)；
  極低密度脂蛋白0.06～0.3g/L(6～30mg/dl)；
  低密度脂蛋白<7g/L(<700mg/dl)；
  高密度脂蛋白：
  男0.52±0.11g/L(43±18mg/dl)；
  女0.55±0.13g/L(47±2mg/dl)。

血清脂蛋白和血清脂蛋白電泳臨床意義

• 1、增高：見(jiàn)于原發(fā)性高脂血癥。
  2、降低：見(jiàn)于低脂蛋白血癥。

血清脂蛋白和血清脂蛋白電泳檢查方法

• 靜脈采血后立即送檢，檢測(cè)操作：
  1、將緩沖液加入電泳槽內(nèi)，調(diào)節(jié)兩側(cè)槽內(nèi)的緩沖液，使其處于同一平面。
  2、醋酸纖維素薄膜的準(zhǔn)備：取醋酸纖維素薄膜(2cm×8cm)在毛面的一端(負(fù)極側(cè))1.5cm處用鉛筆輕劃一橫線，做點(diǎn)樣標(biāo)記。編號(hào)，并標(biāo)明正、負(fù)極后，將薄膜置于巴比妥-巴比妥鈉緩沖液中浸泡，待充分浸透后(一般為20min)取出，夾于潔凈濾紙中間吸去多余的緩沖液。
  3、將醋酸纖維素薄膜毛面向上貼于電泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取無(wú)溶血血清3～5μl于橫線處沿橫線加樣，樣品應(yīng)與薄膜的邊緣保持一定的距離，以免電泳圖譜中的蛋白區(qū)帶變形，待血清滲入薄膜后，反轉(zhuǎn)薄膜，使光面朝上，平直地貼于電泳槽支架上，用雙層濾紙或四層紗布將薄膜的兩端與緩沖液連通，稍待片刻。
  4、接通電源，注意醋酸纖維素薄膜上的正、負(fù)極，切勿接錯(cuò)。電壓90～150V，電流0.4～0.6mA/cm(不同的電泳儀所需電壓，電流可能不同，應(yīng)靈活掌握)，夏季通電45min，冬季通電時(shí)間稍長(zhǎng)，約為60min，電泳區(qū)帶展開(kāi)約25～35mm即可。
  5、染色：通電完畢，取下薄膜直接浸于麗春紅S染液或氨基黑10B染色液中，染色5～10min(以白蛋白區(qū)帶染透為止)，然后在漂洗液中漂去剩余染料，直至背景無(wú)色為止。
  6、定量：
  ① 比色法：將漂洗的薄膜吸干，剪下各染色的蛋白區(qū)帶入相應(yīng)的試管中，在白蛋白管中加0.4mol/L氫氧化鈉6ml(計(jì)算時(shí)吸光度乘以2)，其余各管加 3ml，振搖數(shù)次，置37℃水箱20min使其色澤浸出。氨基黑10B染色用分光光度計(jì)在620nm處讀取各管吸光度，然后計(jì)算出各管的含量(同時(shí)做空白管對(duì)照)。
  麗春紅S染色時(shí)浸出液用0.1mol/L氫氧化鈉，加入量同上法。10min后，白蛋白管內(nèi)加400ml/L醋酸 0.6ml(計(jì)算吸光度時(shí)乘以2)，其余各管加0.3ml，以中和部分氫氧化鈉，使色澤加深，必要時(shí)離心，取上清液用分光光度計(jì)在520nm處讀取各管的吸光度(同時(shí)作空白對(duì)照)，然后計(jì)算各自的含量。
  ②光密度計(jì)掃描法：A.透明：吸去薄膜上的漂洗液(為防止透明液被稀釋影響透明結(jié)果)，將薄膜浸入透明液中2～3min，然后取出，以滾動(dòng)的方式平貼于潔凈無(wú)劃痕的載物玻璃片上(切勿產(chǎn)生氣泡)，將此玻片豎立片刻，除去多余透明液后，置于恒溫 90～100℃的烘箱內(nèi)，烘烤10～15min，取出冷卻至室溫，用此法透明的各蛋白區(qū)帶鮮明，薄膜平整，可供直接掃描和永久保存(用氫萘或液體石蠟透明，應(yīng)將漂洗過(guò)的薄膜烘干后進(jìn)行透明，此法透明的薄膜不能存久，且易發(fā)生皺折)。②掃描定量：將已透明的薄膜放入全自動(dòng)光密度計(jì)或其他光密度計(jì)暗箱內(nèi)，進(jìn)行掃描分析。 

血清脂蛋白和血清脂蛋白電泳注意事項(xiàng)

• 1、樣本：可用新鮮、未冷凍的血清分離脂蛋白。血漿不適合用來(lái)做脂蛋白電泳，因?yàn)闀?huì)出現(xiàn)一條纖維蛋白原區(qū)帶。
  2、帶有清晰的分離組分的脂蛋白圖形是進(jìn)行準(zhǔn)確解釋的先決條件。如果能夠很好地滿足這些條件，在脂蛋白電泳和參考方法(超速離心法)之間就可以相當(dāng)一致。各組分的精密度不同，用變異系數(shù)表示，估計(jì)一般都在5%以下。
  3、偶爾α-脂蛋白會(huì)消失和(或)出現(xiàn)一條舌狀的窄的α-脂蛋白區(qū)帶。這是因?yàn)橛坞x脂肪酸在。α-脂蛋白上積聚，造成了這些微粒帶有電荷相等。由于α-區(qū)帶密度增大，從而導(dǎo)致結(jié)果偏高。和沉淀技術(shù)相比，定量脂蛋白電泳的耗資較高。