血涂片概述
血涂片是血液細(xì)胞學(xué)檢查的基本方法,應(yīng)用極廣,特別是對(duì)各種血液病的診斷有很大價(jià)值。但血片制備和染色不良,常使細(xì)胞鑒別發(fā)生困難,甚至導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)論。例如,血膜過厚細(xì)胞重疊縮小,血膜太薄白細(xì)胞多集中于邊緣;染色良好的血片是血液學(xué)檢查主要基本技術(shù)之一。
血涂片正常值
體內(nèi)菌群的種類和比例正常,人體處于動(dòng)態(tài)平衡健康狀態(tài),為陰性。
血涂片臨床意義
異常結(jié)果
一、異常白細(xì)胞形態(tài)
1.中性粒細(xì)胞的毒性變化,多見于嚴(yán)重感染及中毒,密切觀察白細(xì)胞數(shù)量及中性粒細(xì)胞的毒性變化對(duì)判斷感染的程度、病人抵抗能力和判斷預(yù)后有重要的臨床價(jià)值。
2.中性粒細(xì)胞的其它異常變化 (1)巨多分葉核中性粒細(xì)胞――多見于巨幼細(xì)胞貧血。(2)棒狀小體――主要見于急性非淋巴細(xì)胞白血病。(3)其它異常粒細(xì)胞 多是與遺傳有關(guān)的異常形態(tài)變化。
3.異型淋巴細(xì)胞 ,多見于嚴(yán)重的病毒感染、過敏及中毒。其中發(fā)熱、頜下及頸部多處淋巴結(jié)腫大、白細(xì)胞增加、異型淋巴細(xì)胞超過10%的病人,診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥的可能性較大。部分兒童血中也可見到某一類型的異型淋巴細(xì)胞,但不超過3%,無臨床診斷價(jià)值。
4.涂抹細(xì)胞或籃狀細(xì)胞,見于淋巴細(xì)胞白血病。
二、血液系統(tǒng)疾病可影響到紅細(xì)胞的質(zhì)量,特別是貧血病人,不僅其紅細(xì)胞的數(shù)量和血紅蛋白濃度降低,而且會(huì)有相應(yīng)特異的紅細(xì)胞形態(tài)改變,表現(xiàn)在紅細(xì)胞大小、形狀、染色性質(zhì)和內(nèi)涵物的異常。
需要檢查的人群有異型淋巴細(xì)胞,白血病,異常粒細(xì)胞,巨幼細(xì)胞貧血,淋巴細(xì)胞白血病,貧血等癥狀者。
血涂片檢查方法
血涂片的制作及血細(xì)胞觀察
1、取末捎血一滴置于玻片的一端,左手持載玻片,右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方后移接觸血滴,血滴即沿推片散開,然后便推片與載片夾角保持30-45度平穩(wěn)地向前移動(dòng),載片上保留下一薄層血膜。
2、血涂片制成后可手持玻片在空氣中揮動(dòng),使血膜迅速干燥,以免血細(xì)胞皺縮。
3、用蠟筆在血膜兩側(cè)劃線,以防染液溢出,然后將血膜平放在染色架上,加瑞氏染液2-3滴,使覆蓋整個(gè)血膜,固定0.5-1.0分鐘。滴加等量或稍多的新鮮蒸餾水,與染料混勻染色5-10分鐘。
4、用清水沖去染液,待自然干燥后或用吸水紙吸干,即可置血涂片于顯微鏡下進(jìn)行鏡檢。
5、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。
血涂片注意事項(xiàng)
檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習(xí)慣,注意個(gè)人衛(wèi)生。
檢查時(shí)要求
1、玻片的清洗:新玻片常有游離堿質(zhì),因此應(yīng)用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時(shí),然后再徹底清洗。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20分鐘,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來水反復(fù)沖洗,必要時(shí)再置95%乙醇中浸泡1小時(shí),然后擦干或烤干備用。使用玻片時(shí)只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面;,以保持玻片清潔,干燥,中性、無油膩。
2、 細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感,在染色過程中玻片必須化學(xué)清潔,配制瑞氏染液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,致使細(xì)胞的識(shí)別困難,甚至造成錯(cuò)誤。
3、 一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊,兩側(cè)留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免細(xì)胞溶解和發(fā)生退行性變。
4、血膜未干透,細(xì)胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落,因此血膜必需充分干燥。
5、染色時(shí)間與染液濃度,室溫高低,細(xì)胞多少有關(guān)。染液越淡,室溫越低,細(xì)胞越多,所需染色時(shí)間越長(zhǎng)或應(yīng)適當(dāng)增加染液量,因此染色時(shí)間應(yīng)視具體情況而定。特別是更換新染料時(shí)必須經(jīng)試染,摸索最佳染色條件。
6、 染液不可過少,以防蒸發(fā)干燥染料沉著于血片上難沖洗干凈。
7、 沖洗時(shí)應(yīng)用流水將染液沖去。不能先倒掉染液,以免染料沉著于血片上。
8、染色過深可用甲醇或酒精適當(dāng)脫色,最好不復(fù)染,必須復(fù)染時(shí),可將染液先稀釋好再復(fù)染。
9、染色時(shí)應(yīng)注意保護(hù)血膜尾部細(xì)胞,不能劃掉。因?yàn)轶w積較大細(xì)胞常在此處出現(xiàn)。