腺病毒抗體概述
腺病毒(adenovirus)是20面體立體對(duì)稱無(wú)囊膜的雙鏈DNA病毒。病毒衣殼由252個(gè)殼微粒組成,其中240個(gè)為六鄰體,12個(gè)五鄰體。六鄰體分布在20個(gè)三角面上和邊緣,五鄰體位于20面體的頂角上。每個(gè)五鄰體由一個(gè)基底和1根纖維組成,纖維頂端有一小結(jié)。纖維的長(zhǎng)度不一,其中段蛋白決定血凝的特性,進(jìn)入機(jī)體可產(chǎn)生血凝抑制抗體。腺病毒可引起多種疾病,最常見(jiàn)的有嬰幼兒急性呼吸道感染、腺病毒性肺炎、流行性角結(jié)膜炎、咽結(jié)合膜炎,其他一些疾病如嬰幼兒腹瀉、出血性膀胱炎、心肌炎、腦膜炎等。血清學(xué)試驗(yàn)對(duì)確定腺病毒感染有重要意義。
腺病毒抗體正常值
陰性。
腺病毒抗體臨床意義
陽(yáng)性急性呼吸道感染、急性結(jié)膜炎、胃腸炎、泌尿生殖系統(tǒng)感染。
腺病毒抗體檢查方法
(1)直接法:熒光標(biāo)記抗體直接與病毒抗原反應(yīng)。此方法簡(jiǎn)便、快速、特異性高,但敏感性差。
①固定:將病毒抗原滴玻片上,冷丙酮中固定10min,并作陽(yáng)性和陰性對(duì)照。
②洗滌:pH7.4的PBS液洗滌3次。
③染色:滴加相應(yīng)的熒光抗體,置于濕盒中37℃,作用30min。
④洗滌:pH7.4 PBS液洗滌3次。
⑤晾干:封片觀察。封片用80%的甘油和10% 0.01mol/L pH7.4的PBS液。
(2)間接法:病毒抗原先與第一抗體結(jié)合(病人恢復(fù)期血清或病毒免疫動(dòng)物血清)再與第二抗體(熒光抗體)反應(yīng)。該法敏感性強(qiáng)。
①固定:待檢病毒抗原標(biāo)本按一定稀釋度滴于玻片上,同時(shí)作陽(yáng)性和陰性對(duì)照,冷丙酮中固定10min。
②洗滌:pH 7.4 PBS液洗3次。
③加入一定稀釋度的第一抗體,濕盒中37℃作用30min。
④洗滌:pH 7.4 PBS液洗3次。
⑤加第二抗體(熒光抗體),濕盒中37℃作用30min。
⑥洗滌:pH 7.4 PBS液洗3次。
⑦晾干、封片、觀察。
(3)結(jié)果判定:熒光顯微鏡鏡檢,根據(jù)特異性的熒光強(qiáng)度判定結(jié)果,用加減號(hào)表示:
(-):無(wú)熒光。
(±):極弱的可疑熒光。
(+):熒光較弱,但清晰可見(jiàn)。
(++):熒光明亮。
(+++~++++):熒光閃亮,且范圍廣泛。
腺病毒抗體注意事項(xiàng)
腺病毒感染標(biāo)本包括咽拭標(biāo)本、鼻腔洗液、角膜拭標(biāo)本、肛門(mén)拭標(biāo)本、尿液標(biāo)本、糞便標(biāo)本等。查抗體需雙份血清標(biāo)本,第一份血清標(biāo)本應(yīng)在癥狀出現(xiàn)后立即采取,第二份標(biāo)本應(yīng)在發(fā)病后2~3周采取。應(yīng)盡量縮短采取標(biāo)本與檢測(cè)之間的時(shí)間,如時(shí)間長(zhǎng),則應(yīng)將其保存于-20℃冰箱中。